【摘 要】
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目的研究小檗碱(berberine,BBR)在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用。方法建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型,将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+IFN-γ组、TNF-
【机 构】
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重庆医科大学药学院药理学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,
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目的研究小檗碱(berberine,BBR)在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用。方法建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型,将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+IFN-γ组、TNF-α+IFN-γ+BBR组。用电阻仪测定跨单层肠上皮细胞电阻(TER),测定时相点为处理后0、6、12、24、36 h和48 h;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白Occludin的分布及表达变化;蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)的蛋白表达。结果对照组与BBR组TER均无明显变化;TNF-α+IFN-γ组TER逐渐下降,并于12、24、36 h及48 h显著低于0 h(P<0.05);TNF-α+IFN-γ+BBR组也呈逐渐下降趋势,但降幅小于TNF-α+IFN-γ组,并于12、24、36 h及48 h显著高于TNF-α+IFN-γ组(P<0.05)。各组紧密连接蛋白Occludin表达无明显变化(P>0.05);但TNF-α+IFN-γ组Occludin形态有明显变化,并发生重分布,而TNF-α+IFN-γ+BBR组Occludin形态变化则较TNF-α+IFN-γ组明显减轻。TNF-α+IFN-γ组pMLC表达显著高于对照组或BBR组(P<0.05),而TNF-α+IFN-γ+BBR组pMLC表达则明显低于TNF-α+IFN-γ组(P<0.05)。结论小檗碱通过降低MLC磷酸化水平,改善紧密连接蛋白定位分布变化,从而减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害。
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