一株新蛋白磷酸酶基因（Sy2）的原核表达载体构建及鉴定

来源 :疾病控制杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenchenyaya

【摘要】

：

目的用含有人Sy2酪氨酸磷酸酶基因的pOTB7质粒，构建Sy2原核表达重组子，并用该重组子转化原核细胞，表达出含Sy2的融合蛋白，为将来以此融合蛋白为抗原免疫Balb／c小鼠，制备单克隆抗体，

【作者】

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马广文陈兵鲁云霞李菲菲倪芳郑红汪思应

【机构】

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淮北市人民医院骨科,安徽医科大学基础医学院生化教研室,安徽医科大学基础医学院病理生理教研室

【出处】

：

疾病控制杂志

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

蛋白磷酸酶遗传载体聚合酶链反应 Phosphoprotein phosphatase Genetic vectors Polymerase chain re

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目的用含有人Sy2酪氨酸磷酸酶基因的pOTB7质粒，构建Sy2原核表达重组子，并用该重组子转化原核细胞，表达出含Sy2的融合蛋白，为将来以此融合蛋白为抗原免疫Balb／c小鼠，制备单克隆抗体，进一步研究该基因的功能打好基础。方法用PCR扩增Sy2的PP2C结构域序列，限制性内切酶双酶切，构建到表达载体pET28a（＋）中，酶切、测序等鉴定后，重组子pET28a（＋）-Sy2转染原核细胞，用载体标签HiS抗体经SDS-PAGE、Western blot方法检测Sy2重组蛋白的表达。结果成功构建出pET28a

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