【摘 要】
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采用抑制性差减杂交方法,分别从经重力环境改变适应性锻炼(实验组)和未经重力环境改变适应性锻炼(驱动组)的两组SD大鼠的淋巴细胞中分别提取RNA和mRNA,并经逆转录酶合成dscDN
【机 构】
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南京师范大学生命科学学院,山东大学附属第二医院泌尿外科,东北师范大学细胞与遗传研究所,北京空军总医院分子生物学研究中心
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采用抑制性差减杂交方法,分别从经重力环境改变适应性锻炼(实验组)和未经重力环境改变适应性锻炼(驱动组)的两组SD大鼠的淋巴细胞中分别提取RNA和mRNA,并经逆转录酶合成dscDNA,经Rsa Ⅰ酶切后将实验组cDNA分为2组,分别与两种不同的接头衔接,再与驱动组cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增.随机挑选80个克隆,通过斑点杂交,初步筛选出20个阳性克隆.
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