观察亚砷酸钠(NaAsO2)对原代培养大鼠小脑颗粒细胞凋亡和神经球蛋白mRNA表达的影响。
方法选取出生后7~8 d的Wistar大鼠20只,断头取小脑皮层,制备颗粒细胞悬液,以4 × 109个/m2的密度接种于培养液,采用不同浓度NaAsO2[0(对照)、2、5、10 μmol/L]进行染毒。培养24 h时,采用激光共聚焦法检测细胞内活性氧(ROS)和细胞凋亡;培养24、48 h时,采用实时荧光定量PCR法检测细胞内神经球蛋白mRNA表达。
结果培养24 h时,对照和2、5、10 μmol/L染砷组ROS荧光强度分别为421.32±53.52、1 082.09±321.58、2 223.02±1 011.37、1 366.87±102.14,组间比较差异有统计学意义(F= 5.873,P< 0.05);细胞凋亡率分别为(8.91±5.63)%、(26.46±1.77)%、(43.65±14.45)%、(56.04±6.95)%,组间比较差异有统计学意义(F= 18.369,P< 0.05)。培养24 h时,对照和2、5、10 μmol/L染砷组神经球蛋白mRNA表达分别为1.00±0.06、0.77 ± 0.22、0.43±0.18、0.42±0.14,组间比较差异有统计学意义(F= 18.235,P< 0.05);培养48 h时,神经球蛋白mRNA表达分别为1.00±0.01、0.89±0.09、0.60±0.16、0.08±0.02,组间比较差异有统计学意义(F= 80.843,P < 0.05)。
结论随着NaAsO2浓度升高,ROS和凋亡水平升高,而神经球蛋白mRNA表达明显降低,表明机体受到刺激后,产生的保护性蛋白可能被消耗,推测砷所诱导的神经球蛋白的表达在一定程度上与砷所导致的神经损伤有关。