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为建立鼻气管鸟杆菌（ORT）TaqMan荧光定量PCR检测方法，本研究根据ORT 16S rRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针，通过优化反应条件、特异性、敏感性、重复性试验和临床样品的检测，建立了ORTTaqMan荧光定量PCR检测方法。实验结果表明：该方法具有良好特异性；最低可以检测到1．09×10^2拷贝／μL的标准品阳性质粒；批内和批间变异系数均小于3％；23份临床样品检测的阳性率为48％。该方法可以用于鸡ORT感染的早期诊断及ORT的快速鉴定和定量分析。