【摘 要】
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根据犬细小病毒（Canine Parvovirus,CPV）SH14株基因序列设计引物,采用PCR方法扩增CPV VP2基因,经Bam HⅠ、XhoⅠ双酶切后,将其克隆至p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,安徽农业大学动物科技学院,甘肃农业大学
【基金项目】
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国家自然科学基金（31270194、31300141）, 农业公益性行业科研专项课题（201303046）
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根据犬细小病毒（Canine Parvovirus,CPV）SH14株基因序列设计引物,采用PCR方法扩增CPV VP2基因,经Bam HⅠ、XhoⅠ双酶切后,将其克隆至p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-VP2,经酶切鉴定和测序验证正确后转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,应用SDS-PAGE法检测蛋白的表达。然后,使用纯化的重组VP2蛋白制备其兔源多克隆抗体,分别应用蛋白免疫印迹、间接免疫荧光检测该抗体的免疫原性。结果表明,p GEX-4T-VP2能在大肠杆菌中以包涵体形式高效
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