【摘 要】
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目的:建立棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导体外培养心肌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及凋亡模型,检测Toll样受体2(TLR2)和NLRC5在此模型中的表达变化及研究相关的可
【机 构】
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广东省医学科学院,广东省人民医院医学研究中心,广州510080,广东;广东省人民医院内分泌科,广州510080,广东
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目的:建立棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导体外培养心肌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及凋亡模型,检测Toll样受体2(TLR2)和NLRC5在此模型中的表达变化及研究相关的可能机制.方法:用500 μmol/L终浓度的PA处理培养H9C2心肌细胞后采用Annexin Ⅴ/PI双染和流式细胞术分析细胞凋亡情况,并分别采用q-PCR及Western blot方法分析处理后细胞的胰岛素受体(InsR)、CD36、PGC-1α、TLR2、NLRC5、SIRT1、p-AMPK/AMPK的mRNA或蛋白表达变化.结果:与对照组比较,PA处理24 h后H9C2细胞的早、晚期和总凋亡率显著升高,分别为(7.55±3.80)％、(53.84±4.70)％和(61.39±8.54)％(P＜0.05);处理6h后心肌细胞的PGC-1α mRNA相对表达量开始下降(P＜0.05),TLR2和NLRC5则显著升高(P＜0.01),CD36mRNA相对表达量在PA处理14 h时升高(P＜0.05);InsR、SIRT1和AMPK蛋白相对表达量从PA处理8h时开始下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:TLR2/NLRC5参与PA诱导的心肌细胞IR和凋亡,并且可能与AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路的活性下降有关.
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