目的 观察NR2B反义寡核苷酸(NR2B antisense oligonucleotide,ANR2B)对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干μ受体与κ受体表达的影响,探讨N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体的NR2B亚基与阿片μ受体与κ受体在介导吗啡依赖和耐受过程中的相互作用.方法 雄性SD大鼠,体重230 g～270 g.鞘内埋管成功大鼠40只,按随机数字表法分为5组,每组8只.吗啡皮下注射首日10 mg/kg,每日2次,隔日每次增加10 mg/kg,至第6天末次注射50 mg/kg,建立吗啡依赖模型,以纳洛酮4 mg/kg单次腹腔注射建立吗啡依赖催促戒断模型,观察纳洛酮催促戒断症状并评价造模是否成功.分为吗啡依赖组(A组)；相应时间点皮下注射等量生理盐水为空白对照组(B组)；末次注射吗啡后4h腹腔注射盐酸纳洛酮4 mg/kg激发戒断症状为吗啡戒断组(C组)；在皮下注射吗啡的同时鞘内注射15 nmol ANR2B为吗啡+ANR2B组(D组)；在纳洛酮激发前30 min鞘内注射15 nmol ANR2B为戒断+ANR2B组(E组).应用RT-PCR检测吗啡依赖与戒断大鼠脊髓和脑干μ受体与κ受体mRNA表达.结果 ①吗啡依赖大鼠脊髓和脑干NR2B mRNA表达(0.965±0.012；0.958±0.020)较对照组(0.763±0.031)明显上调,NR2B反义寡核苷酸使其表达明显下调(0.786±0.011).②吗啡戒断症状主要表现为湿狗样摇体、激惹、齿颤、眼睑下垂、腹泻等.鞘内注射NR2B反义寡核苷酸则明显减轻戒断症状的总评分(32±2,22±3).③吗啡依赖大鼠脊髓和脑干中μ受体mRNA表达(0.955±0.021,0.946±0.013)较对照组升高有统计学意义.鞘内注射ANR2B则明显降低吗啡依赖大鼠脊髓和脑干中μ受体mRNA的表达(0.801±0.013;0.824±0.021).纳洛酮激发戒断症状后1h,脊髓和脑干中μ受体mRNA的表达较吗啡依赖组明显下降.激发前30 min鞘内注射ANR2B,脊髓和脑干中μ受体mRNA表达与戒断组比较变化无统计学意义.④吗啡依赖大鼠脊髓和脑干中κ受体mRNA表达(0.735±0.025；0.757±0.010)较对照组(0.974±0.016；0.982±0.013)降低有统计学意义；同时鞘内注射ANR2B则显著增加脊髓和脑干中κ受体mRNA的表达(0.875±0.012; 0.854±0.016)；纳洛酮激发戒断症状后1h,脊髓和脑干中κ受体mRNA的表达较吗啡依赖组明显增高；激发前30min鞘内注射ANR2B,脊髓和脑干中κ受体mRNA表达与戒断组比较变化无统计学意义.各组中β -actin表达量差异无统计学意义.结论 脊髓和脑干中μ受体与κ受体表达的变化在吗啡依赖与戒断反应中发挥了重要作用.鞘内注射NR2B反义寡核苷酸通过有效逆转吗啡依赖与戒断大鼠脊髓和脑干中μ受体与κ受体表达的变化趋势,从而发挥其抑制吗啡依赖与减轻戒断症状的作用。