目的 探讨二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)对人肝细胞(HL-7702)钙稳态与钙蛋白酶(calpain)Ⅰ、Ⅱ基因表达的影响.方法 分别以10、25、50、100、200 mmol/L DMF对人肝细胞染毒,空白对照组加等体积的DMEM,采用钙离子荧光探针(Fluo-3,AM)技术动态监测人肝细胞内Ca2+浓度的变化.以10、25、50、100、150、200 mmol/L剂量染毒24 h后,倒置相差显微镜观察细胞形态,噻唑蓝法观察各组细胞存活率.以10、25、50、100、150 mmol/L剂量DMF染毒24 h,空白对照组加入等体积的DMEM,通过实时定量PCR检测各组calpain Ⅰ、Ⅱ的mRNA表达水平.结果 肝细胞经不同浓度DMF处理24 h后,各组的细胞存活率差异有统计学意义(P＜0.01),50、100、150、200 mmol/L剂量组的细胞存活率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).倒置相差显微镜观察发现,随着DMF染毒剂量的增加,肝细胞逐渐失去原来的形状,出现肿胀、回缩等损伤现象,150 mmol/L染毒组细胞甚至出现变圆、漂浮等现象.随着DMF染毒剂量增加,细胞内Fluo-3的荧光强度升高,差异有统计学意义(P＜0.05),存在剂量-反应关系.各剂量组calpain Ⅰ和calpainⅡmRNA相对表达量的差异有统计学意义(P＜0.01),且随着染毒剂量的增加而升高,但DMF浓度达150 mmol/L时,却对calpain Ⅰ mRNA的表达没有促进作用.结论 DMF引起的肝损伤与细胞内的钙稳态失调及calpain mRNA水平增加有关。