论文部分内容阅读
摘要[目的]明确敌敌畏在胡萝卜上的残留及消解动态。[方法]采用田间试验，建立敌敌畏在胡萝卜中的残留分析方法。[结果]将77.5%敌敌畏乳油按1 800 g a.i./hm2施药3次后，3 d后在胡萝卜和土壤中均未检出，消解快，不会造成累积性残留;当敌敌畏按1 200和1 800 g a.i./hm2，分别施药2次和3 次，施药间隔为7 d，于末次施药后5、7和14 d采收胡萝卜，其残留量为0.010～0.112 mg/kg，低于我国规定的敌敌畏在深色蔬菜中的最大残留限量值0.2 mg/kg。[结论]建议在使用77.5%敌敌畏乳油防治胡萝卜病害时，用药量不超过有效成分1 200 g a.i./hm2，最多施药3次，采收安全间隔期为7 d。
关键词敌敌畏;胡萝卜;残留;消解
中图分类号S481+.8;TQ450.2文献标识码A
文章编号0517-6611（2019）02-0185-03
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.02.057
胡萝卜是双子叶植物纲伞形科胡萝卜属植物，其肉质根供食用，为春、冬两季的主要蔬菜之一，享有“金笋”和“小人参”之美誉[1]。因其营养价值高，在我国栽培面积较大，但由于胡萝卜茎叶部分接近地面，根部深入土壤，容易引发微管蚜、茴香凤蝶和黑腐病、菌核病、软腐病等病虫害。 敌敌畏（dichlorvos）又名O，O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯，分子式为C4H7Cl2O4P，是一种广谱性杀虫、杀螨的有机磷杀虫剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用，可用于多种农田作物和果树的害虫防治[2-3]。目前，敌敌畏在我国水稻、小麦、玉米、十字花科蔬菜等作物上的残留分析方法有GC、GC-MS等[4-7]，但该药在胡萝卜上的残留分析鲜见报道。笔者通过敌敌畏在胡萝卜和土壤中的消解动态和最终残留试验，建立敌敌畏在胡萝卜上的残留分析方法，获得了敌敌畏的残留及消解动态结果，旨在为敌敌畏在胡萝卜上的合理使用提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料与仪器
Agilent Technologies 7890A气相色谱仪（FPD检测器，美国安捷伦科技有限公司）;CCA-20低温冷却水循环泵（巩义予华仪器有限责任公司）;IKA-T18高速分散匀质机（德国ULTRA-TURRAX公司）;DK-98-ⅡA电热恒温水浴锅（天津泰斯特仪器有限公司）;2HWY-2102型恒温振荡器（上海智城分析仪器制造有限公司）;SPH-21026振荡仪（昆山超声仪器有限公司）;KQ2200DE型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）;TP-220A电子天平（湘仪天平仪器设备有限公司）;FA2004N万分之一电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）。
敌敌畏标准品：纯度99.6%（上海农药研究所有限公司）;丙酮、乙腈（分析纯，天津市恒兴化学试剂有限公司）;氯化钠（分析纯，天津市博迪化工有限公司）;超纯水。
1.2田间试验
参照农业部制定的《农药残留试验准则》[8]和《农药登记残留田间试验标准操作规程》[9]，分别于2016年5月至2017年1月在湖南长沙、浙江杭州、河南新乡、四川成都、河北石家庄、内蒙古乌兰察布进行田间试验。
1.2.1
消解动态试验。
敌敌畏消解动态试验在湖南长沙和河北石家庄进行。将77.5%敌敌畏乳油按1 800 g a.i./hm2施药剂量对水稀释（750 kg/hm2），分别对幼苗期胡萝卜（播种后35 d左右）及对照土壤试验地各施药1次，在施药后2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d采集胡萝卜茎叶样品及土壤样品，贮存于-20 ℃冰柜。
1.2.2最终残留试验。
敌敌畏最终残留试验在湖南长沙、浙江杭州、河南新乡、四川成都、河北石家庄、内蒙古乌兰察布6地进行。试验按1 200和1 800 g a.i./hm2施药（胡萝卜根茎开始膨大），分别施药2次和3 次，每次施药间隔期为7 d，在末次施药后的5、7和14 d分别采集胡萝卜块根样品，贮存于-20 ℃冰柜。
1.3分析方法
1.3.1样品提取。
分别将胡萝卜与植株样品切碎，各称25.0 g 胡萝卜和植株样品，每份样品中加入50 mL乙腈高速匀浆2 min，转移至锥形瓶20 ℃振荡30 min，再经布氏漏斗减压抽滤，滤液转移至装有5 g氯化钠的比色管中，经剧烈振荡后静置分层，取10 mL上清液于80 ℃水浴蒸至近干，再用丙酮定容至5 mL，过0.22 μm滤膜后待气相色谱测定。将25.0 g土壤样品置于锥形瓶后直接振荡，并与胡萝卜样品同等条件下抽滤、分层、浓缩、定容，制得待测样品。
1.3.2色谱检测条件。
色谱柱：DB-1701柱（30 m×320 μm×1 μm，美國安捷伦）;载气：氮气，纯度≥99.999%;流速：10 mL/min;进样口温度：220 ℃;柱温：150 ℃保持2 min，以10 ℃/min升至190 ℃后保持1 min;检测器（FPD）温度250 ℃;氢气流量：95 mL/min;空气流量：100 mL/min;不分流进样，进样量2 μL。
2结果与分析
2.1色谱检测方法
敌敌畏标准溶液（丙酮定容）质量浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L，其峰面积（y）与进样浓度（x）之间线性关系良好（标准工作曲线为y=12 577.95x-202.17，R2=0.999 9）。
在选定的气相色谱检测条件下敌敌畏的最小检出量均为1×10-11 g，在胡萝卜、植株和土壤中的最小检出质量浓度（LOQ）均为0.01 mg/kg。敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中的3个水平添加回收率见表1，每个水平5次重复。由表1可知，敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中的平均添加回收率分别为94.8%～96.7%、81.8%～101.6%、80.0%～83.2%，相对标准偏差分别为4.0%～8.4%、2.7%～9.0%、2.7%～9.3%。根据该结果，在选定检测条件下敌敌畏分析方法的准确度、精密度和灵敏度均符合农药残留检测方法的要求，可用于敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中残留量的分析和检测。 由图1可知，在选定色谱分析条件下，敌敌畏标准溶液的出峰时间为311 min，胡萝卜和土壤基质中的敌敌畏出峰时间为3.13 min，胡萝卜植株基质中的敌敌畏出峰时间为307 min，检测结果基线稳定，出峰良好。
2.2敌敌畏在胡萝卜植株和土壤中的消解动态
由表2可知，施药后敌敌畏在湖南长沙和河北石家庄2地胡萝卜植株上的原始沉积量分别为2.636和0.409 mg/kg，而土壤则更小，分别为0.016和0.010 mg/kg;第1天时，胡萝卜植株中敌敌畏消解率为91.91%～92.18%，第3天时，胡萝卜植株中敌敌畏消解率>98.67%，敌敌畏消解快速;土壤中敌敌畏消解更快，1 d后均未检出敌敌畏残留。这表明在我国自然环境下，敌敌畏降解快速，不会造成累积性残留。
2.3敌敌畏在胡萝卜中的最终残留
由表3可知，77.5%敌敌畏乳油1 200 g a.i./hm2 2次药后5～7 d的残留量为<0.010～0.043 mg/kg，药后14 d未检出;3次5～7 d药后敌敌畏的残留量为<0.010～0.064 mg/kg，药后14 d未检出。77.5%敌敌畏乳油1 800 g a.i./hm2 2次药后5～14 d的残留量为<0.010～0.088 mg/kg;3次5～14 d药后敌敌畏的残留量为<0.010～0.112 mg/kg。
当敌敌畏按1 200和1 800 g a.i./hm2，分别施药2次和3 次，施药间隔7 d，于末次施药后5、7和14 d采收胡萝卜，其残留量为0.010～0.112 mg/kg，低于我国规定的敌敌畏在深色蔬菜中的最大残留限量值0.2 mg/kg。建议在使用77.5%敌敌畏乳油防治胡萝卜病害时，用药量不超过有效成分1 800 g a.i./hm2，最多施药3次，采收安全间隔期为7 d，则敌敌畏在胡萝卜上的STMR取0.01 mg/kg，HR为0.046 mg/kg。该试验结果为我国建立敌敌畏在胡萝卜中的MRL标准提供了参考。
3结论
该研究建立了胡萝卜中敌敌畏的分析方法，在选定的气相色谱检测条件下敌敌畏的最小检出量均为1×10-11 g，在胡萝卜、植株和土壤中的最小检出质量浓度（LOQ）均为0.01 mg/kg。该方法前处理省时简便，准确度、精密度和灵敏度均符合农药残留检测方法的要求，可用于敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中残留量的分析和检测。
2016年湖南长沙和河北石家庄的消解动态试验结果表明，77.5%的敌敌畏乳油在胡萝卜植株及土壤中的消解速率快，3～5 d后敌敌畏残留量均低于最小检出浓度0.01 mg/kg，这表明在我国自然环境条件下，敌敌畏不会在胡萝卜及其土壤中累积残留。最终残留试验结果表明，当77.5%敌敌畏乳油按1 200和1 800 g a.i./hm2，分别施药2次和3 次，施药间隔为7 d，于末次施药后5、7和14 d采收胡萝卜，其残留量为0.010～0.112 mg/kg，低于我国规定的敌敌畏在深色蔬菜（胡萝卜属深色蔬菜）中的最大残留限量值020 mg/kg。该结果可为我国制定敌敌畏在胡萝卜中的最大残留限量值提供参考。
参考文献
[1] 陈瑞娟，毕金峰，陈芹芹，等.胡萝卜的营养功能、加工及其综合利用研究现状[J].食品与发酵工业，2013，39（10）：201-206.
[2] 疏义国，张伯舟.40%灭虫清乳油防治棉铃虫的药效试验[J].安徽农业科学，1999（3）：62，70.
[3] 张薇，白春明，马罡，等.葡萄钻蛀类害虫的研究进展[J].安徽农业科学，2018，46（28）：25-28，55.
[4] 李雄，黃安香，胡德禹，等.气相色谱法测定敌敌畏在水稻中的残留[J].农药科学与管理，2014，35（4）：41-44.
[5] 朱春逸，徐梦蕾，刘静波.气相色谱-质谱联用法测定玉米汁中敌敌畏和马拉硫磷的含量[J].食品安全质量检测学报，2015，6（9）：3746-3751.
[6] 王海萍，王红玲，陈建文，等.QuEchERS-气相色谱-质谱法同时测定果蔬中23种农药残留[J].中国卫生检验杂志，2017（9）：1250-1252.
[7] 王峰恩，邓立刚，李霞，等.QuEChERS-气相色谱-串联质谱法同时测定饲草中10种农药残留[J].农药学学报，2017，19（1）：68-75.
[8] 中华人民共和国农业部.农药残留试验准则：NY/T 788—2004[S].北京：中国农业出版社，2004.
[9] 农业部农药检定所.农药登记残留田间试验标准操作规程[M].北京：中国标准出版社，2007.
关键词敌敌畏;胡萝卜;残留;消解
中图分类号S481+.8;TQ450.2文献标识码A
文章编号0517-6611（2019）02-0185-03
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.02.057
胡萝卜是双子叶植物纲伞形科胡萝卜属植物，其肉质根供食用，为春、冬两季的主要蔬菜之一，享有“金笋”和“小人参”之美誉[1]。因其营养价值高，在我国栽培面积较大，但由于胡萝卜茎叶部分接近地面，根部深入土壤，容易引发微管蚜、茴香凤蝶和黑腐病、菌核病、软腐病等病虫害。 敌敌畏（dichlorvos）又名O，O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯，分子式为C4H7Cl2O4P，是一种广谱性杀虫、杀螨的有机磷杀虫剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用，可用于多种农田作物和果树的害虫防治[2-3]。目前，敌敌畏在我国水稻、小麦、玉米、十字花科蔬菜等作物上的残留分析方法有GC、GC-MS等[4-7]，但该药在胡萝卜上的残留分析鲜见报道。笔者通过敌敌畏在胡萝卜和土壤中的消解动态和最终残留试验，建立敌敌畏在胡萝卜上的残留分析方法，获得了敌敌畏的残留及消解动态结果，旨在为敌敌畏在胡萝卜上的合理使用提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料与仪器
Agilent Technologies 7890A气相色谱仪（FPD检测器，美国安捷伦科技有限公司）;CCA-20低温冷却水循环泵（巩义予华仪器有限责任公司）;IKA-T18高速分散匀质机（德国ULTRA-TURRAX公司）;DK-98-ⅡA电热恒温水浴锅（天津泰斯特仪器有限公司）;2HWY-2102型恒温振荡器（上海智城分析仪器制造有限公司）;SPH-21026振荡仪（昆山超声仪器有限公司）;KQ2200DE型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）;TP-220A电子天平（湘仪天平仪器设备有限公司）;FA2004N万分之一电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）。
敌敌畏标准品：纯度99.6%（上海农药研究所有限公司）;丙酮、乙腈（分析纯，天津市恒兴化学试剂有限公司）;氯化钠（分析纯，天津市博迪化工有限公司）;超纯水。
1.2田间试验
参照农业部制定的《农药残留试验准则》[8]和《农药登记残留田间试验标准操作规程》[9]，分别于2016年5月至2017年1月在湖南长沙、浙江杭州、河南新乡、四川成都、河北石家庄、内蒙古乌兰察布进行田间试验。
1.2.1
消解动态试验。
敌敌畏消解动态试验在湖南长沙和河北石家庄进行。将77.5%敌敌畏乳油按1 800 g a.i./hm2施药剂量对水稀释（750 kg/hm2），分别对幼苗期胡萝卜（播种后35 d左右）及对照土壤试验地各施药1次，在施药后2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d采集胡萝卜茎叶样品及土壤样品，贮存于-20 ℃冰柜。
1.2.2最终残留试验。
敌敌畏最终残留试验在湖南长沙、浙江杭州、河南新乡、四川成都、河北石家庄、内蒙古乌兰察布6地进行。试验按1 200和1 800 g a.i./hm2施药（胡萝卜根茎开始膨大），分别施药2次和3 次，每次施药间隔期为7 d，在末次施药后的5、7和14 d分别采集胡萝卜块根样品，贮存于-20 ℃冰柜。
1.3分析方法
1.3.1样品提取。
分别将胡萝卜与植株样品切碎，各称25.0 g 胡萝卜和植株样品，每份样品中加入50 mL乙腈高速匀浆2 min，转移至锥形瓶20 ℃振荡30 min，再经布氏漏斗减压抽滤，滤液转移至装有5 g氯化钠的比色管中，经剧烈振荡后静置分层，取10 mL上清液于80 ℃水浴蒸至近干，再用丙酮定容至5 mL，过0.22 μm滤膜后待气相色谱测定。将25.0 g土壤样品置于锥形瓶后直接振荡，并与胡萝卜样品同等条件下抽滤、分层、浓缩、定容，制得待测样品。
1.3.2色谱检测条件。
色谱柱：DB-1701柱（30 m×320 μm×1 μm，美國安捷伦）;载气：氮气，纯度≥99.999%;流速：10 mL/min;进样口温度：220 ℃;柱温：150 ℃保持2 min，以10 ℃/min升至190 ℃后保持1 min;检测器（FPD）温度250 ℃;氢气流量：95 mL/min;空气流量：100 mL/min;不分流进样，进样量2 μL。
2结果与分析
2.1色谱检测方法
敌敌畏标准溶液（丙酮定容）质量浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L，其峰面积（y）与进样浓度（x）之间线性关系良好（标准工作曲线为y=12 577.95x-202.17，R2=0.999 9）。
在选定的气相色谱检测条件下敌敌畏的最小检出量均为1×10-11 g，在胡萝卜、植株和土壤中的最小检出质量浓度（LOQ）均为0.01 mg/kg。敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中的3个水平添加回收率见表1，每个水平5次重复。由表1可知，敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中的平均添加回收率分别为94.8%～96.7%、81.8%～101.6%、80.0%～83.2%，相对标准偏差分别为4.0%～8.4%、2.7%～9.0%、2.7%～9.3%。根据该结果，在选定检测条件下敌敌畏分析方法的准确度、精密度和灵敏度均符合农药残留检测方法的要求，可用于敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中残留量的分析和检测。 由图1可知，在选定色谱分析条件下，敌敌畏标准溶液的出峰时间为311 min，胡萝卜和土壤基质中的敌敌畏出峰时间为3.13 min，胡萝卜植株基质中的敌敌畏出峰时间为307 min，检测结果基线稳定，出峰良好。
2.2敌敌畏在胡萝卜植株和土壤中的消解动态
由表2可知，施药后敌敌畏在湖南长沙和河北石家庄2地胡萝卜植株上的原始沉积量分别为2.636和0.409 mg/kg，而土壤则更小，分别为0.016和0.010 mg/kg;第1天时，胡萝卜植株中敌敌畏消解率为91.91%～92.18%，第3天时，胡萝卜植株中敌敌畏消解率>98.67%，敌敌畏消解快速;土壤中敌敌畏消解更快，1 d后均未检出敌敌畏残留。这表明在我国自然环境下，敌敌畏降解快速，不会造成累积性残留。
2.3敌敌畏在胡萝卜中的最终残留
由表3可知，77.5%敌敌畏乳油1 200 g a.i./hm2 2次药后5～7 d的残留量为<0.010～0.043 mg/kg，药后14 d未检出;3次5～7 d药后敌敌畏的残留量为<0.010～0.064 mg/kg，药后14 d未检出。77.5%敌敌畏乳油1 800 g a.i./hm2 2次药后5～14 d的残留量为<0.010～0.088 mg/kg;3次5～14 d药后敌敌畏的残留量为<0.010～0.112 mg/kg。
当敌敌畏按1 200和1 800 g a.i./hm2，分别施药2次和3 次，施药间隔7 d，于末次施药后5、7和14 d采收胡萝卜，其残留量为0.010～0.112 mg/kg，低于我国规定的敌敌畏在深色蔬菜中的最大残留限量值0.2 mg/kg。建议在使用77.5%敌敌畏乳油防治胡萝卜病害时，用药量不超过有效成分1 800 g a.i./hm2，最多施药3次，采收安全间隔期为7 d，则敌敌畏在胡萝卜上的STMR取0.01 mg/kg，HR为0.046 mg/kg。该试验结果为我国建立敌敌畏在胡萝卜中的MRL标准提供了参考。
3结论
该研究建立了胡萝卜中敌敌畏的分析方法，在选定的气相色谱检测条件下敌敌畏的最小检出量均为1×10-11 g，在胡萝卜、植株和土壤中的最小检出质量浓度（LOQ）均为0.01 mg/kg。该方法前处理省时简便，准确度、精密度和灵敏度均符合农药残留检测方法的要求，可用于敌敌畏在胡萝卜、植株和土壤中残留量的分析和检测。
2016年湖南长沙和河北石家庄的消解动态试验结果表明，77.5%的敌敌畏乳油在胡萝卜植株及土壤中的消解速率快，3～5 d后敌敌畏残留量均低于最小检出浓度0.01 mg/kg，这表明在我国自然环境条件下，敌敌畏不会在胡萝卜及其土壤中累积残留。最终残留试验结果表明，当77.5%敌敌畏乳油按1 200和1 800 g a.i./hm2，分别施药2次和3 次，施药间隔为7 d，于末次施药后5、7和14 d采收胡萝卜，其残留量为0.010～0.112 mg/kg，低于我国规定的敌敌畏在深色蔬菜（胡萝卜属深色蔬菜）中的最大残留限量值020 mg/kg。该结果可为我国制定敌敌畏在胡萝卜中的最大残留限量值提供参考。
参考文献
[1] 陈瑞娟，毕金峰，陈芹芹，等.胡萝卜的营养功能、加工及其综合利用研究现状[J].食品与发酵工业，2013，39（10）：201-206.
[2] 疏义国，张伯舟.40%灭虫清乳油防治棉铃虫的药效试验[J].安徽农业科学，1999（3）：62，70.
[3] 张薇，白春明，马罡，等.葡萄钻蛀类害虫的研究进展[J].安徽农业科学，2018，46（28）：25-28，55.
[4] 李雄，黃安香，胡德禹，等.气相色谱法测定敌敌畏在水稻中的残留[J].农药科学与管理，2014，35（4）：41-44.
[5] 朱春逸，徐梦蕾，刘静波.气相色谱-质谱联用法测定玉米汁中敌敌畏和马拉硫磷的含量[J].食品安全质量检测学报，2015，6（9）：3746-3751.
[6] 王海萍，王红玲，陈建文，等.QuEchERS-气相色谱-质谱法同时测定果蔬中23种农药残留[J].中国卫生检验杂志，2017（9）：1250-1252.
[7] 王峰恩，邓立刚，李霞，等.QuEChERS-气相色谱-串联质谱法同时测定饲草中10种农药残留[J].农药学学报，2017，19（1）：68-75.
[8] 中华人民共和国农业部.农药残留试验准则：NY/T 788—2004[S].北京：中国农业出版社，2004.
[9] 农业部农药检定所.农药登记残留田间试验标准操作规程[M].北京：中国标准出版社，2007.