探讨普通肝素(UFH)对脓毒症肠损伤小鼠肠黏膜血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。
方法将36只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、盲肠结扎穿孔术(CLP)组、UFH组,每组12只。采用CLP制备脓毒症肠损伤小鼠模型;Sham组开腹暴露盲肠、不结扎。UFH组于术前0.5 h和术后12 h经尾静脉注射肝素钠注射液各8 U。术后4 h、24 h各取6只小鼠下腔静脉血和回肠末端标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清白细胞介素(IL-1β、IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,采用比色法测定D-乳酸含量;苏木素-伊红(HE)染色后观察回肠组织病理学变化并进行Chiu评分;免疫组化法检测回肠组织HO-1表达。
结果Sham组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、D-乳酸含量无明显变化;24 h肠黏膜结构基本正常,无HO-1阳性细胞。CLP组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、D-乳酸含量逐渐升高,且明显高于Sham组〔IL-1β(ng/L):4 h为40.87±2.88比22.60±2.05,24 h为113.73±3.96比22.07±2.74;IL-6(ng/L):4 h为63.89±3.26比44.89±3.38,24 h为176.56±5.45比45.76±4.02;TNF-α(ng/L):4 h为194.62±14.13比152.05±6.22,24 h为599.62±10.20比155.90±14.18;D-乳酸(mmol/L):4 h为0.24±0.02比0.19±0.01,24 h为0.33±0.04比0.20±0.02,均P<0.05〕;24 h肠黏膜水肿、炎性细胞浸润,肠绒毛结构破坏,Chiu评分明显高于Sham组〔分:4.5(3.0~5.0)比0(0~1.0),P<0.05〕;肠黏膜局部有少量HO-1阳性细胞。UFH组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、D-乳酸含量显著低于CLP组〔IL-1β(ng/L):4 h为31.53±2.90比40.87±2.88,24 h为61.13±2.80比113.73±3.96;IL-6(ng/L):4 h为51.16±5.68比63.89±3.26,24 h为81.16±4.54比176.56±5.45;TNF-α(ng/L):4 h为171.76±5.60比194.62±14.13,24 h为328.48±10.79比599.62±10.20;D-乳酸(mmol/L):4 h为0.21±0.01比0.24±0.02,24 h为0.24±0.02比0.33±0.04,均P<0.05〕;24 h肠损伤明显减轻,Chiu评分较CLP组明显降低〔分:1.5(1.0~5.0)比4.5(3.0~5.0),P<0.05〕;肠黏膜HO-1阳性细胞明显增加。
结论UFH可通过增强肠黏膜HO-1表达,减少炎性因子释放,减轻肠道炎症反应,从而对脓毒症肠损伤小鼠肠组织起保护作用。