人肝细胞癌相关抗原661基因在大肠杆菌中的克隆、表达及产物纯化

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dsgver454g

【摘要】

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目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(Hepatocellular carcinoma-associated antigens 661,HCA661)原核表达载体并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白.方法:人肝细胞癌SMMC7721细胞基

【作者】

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李树蕾谭岩刘力华段秀梅方艳秋许淑芬

【机构】

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吉林大学基础医学院组织胚胎学教研室

【出处】

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中国免疫学杂志

【发表日期】

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2007年10期

【关键词】

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目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(Hepatocellular carcinoma-associated antigens 661,HCA661)原核表达载体并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白.方法:人肝细胞癌SMMC7721细胞基因组DNA经PCR扩增HCA661基因,克隆到pGEM-T easy中进行酶切、PCR和测序鉴定;构建重组质粒pQE-HCA661,并转化大肠杆菌M15[pREP4],经IPTG诱导表达目的蛋白;镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化靶蛋白后进行Western blot鉴定.

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