酵母双杂合系统BD端血型糖蛋白A表达质粒的构建

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cnsafety

【摘要】

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目的:获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段,并构建酵母双杂合BD端表达质粒.方法:利用RT-PCR方法,从K562细胞mRNA中扩增GPA cDNA片段,约410bp.测序后将其克隆至pbridge载体上.用醋酸

【作者】

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李宏涛傅国辉姜晓姝张宝山孔宪刚

【机构】

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哈尔滨医科大学病理生理学教研室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家重点实验室

【出处】

：

中国病理生理杂志

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

血型糖蛋白酵母菌膜蛋白质类 Glycophorin Yeasts Membrane proteins

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目的:获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段,并构建酵母双杂合BD端表达质粒.方法:利用RT-PCR方法,从K562细胞mRNA中扩增GPA cDNA片段,约410bp.测序后将其克隆至pbridge载体上.用醋酸锂法将构建好的pbridge-GPA转染酵母菌AH109,观察其在选择性培养基上的表达情况.结果:克隆到的410bp GPA cDNA编码的氨基酸序列基本与公布序列相同. pbridge-GPA转染酵母菌后,在SD/Gal/-His/Ura培养基上出现1 mm大小白色菌落. 结论: 获得了血型糖

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