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分别用限制性内切酶EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切质粒pBGgHg,将切下的含双抱蘑菇gpd启动子、EGFP基因和35S终止子的碱基序列连接到含Ap抗性的pBSKⅡ上,再将这一段序列切下连接到含kan抗性的pCAMBIA1300载体上,形成中间质粒载体YH2873。用限制性内切酶Hind Ⅲ分别酶切质粒YIL2873和质粒pDB06,将从pDB06切下的trp3^iar基因连接到中间质粒载怵YH2873上,得到表达载体pSAGF。中间载体pYH2873经限制性内切酶EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切,电泳后显示1.