该研究将米曲霉 RIB40（Aspergillus oryzae RIB40）来源的谷氨酰胺酶（gahB）在黑曲霉（Aspergillus niger）宿主中分泌表达。基于该研究所建立表型鉴定板与孔板培养的通量鉴定筛选方法成功得到重组表达谷氨酰胺酶的转化子 H-gahB，最高酶活力达到 1.35 U/mL。为了增加目的基因在宿主中的拷贝数，我们采用 CRISPR/Cas9 基因组编辑技术重新构建高拷贝的谷氨酰胺酶表达菌株C-gahB，其酶活力提高到 3.56 U/mL，约为 H-gahB 的 2.64 倍。进一步采用 ARTP 诱变技术对工程菌进行传统诱变育种，获得了谷氨酰胺酶工程菌株 A-gahB，其酶活力提升到 4.16 U/mL，比出发菌株 C-gahB 的酶活力提高了 0.17 倍。纯化后的重组 gahB 的比酶活达到 40.63 U/mg，最适温度为 37 ℃，最适 pH 为 7.0，其在 20 ℃至 40 ℃及 pH 5.5 至 8.0 之间稳定性较好。K+对 gahB 的酶活力具有激活作用，Zn2+和 Mn2+则对 gahB 的酶活力有较为强烈的抑制作用。当盐浓度为 18%时，gahB 表现出 35.38%的相对酶活力。本文第一次在黑曲霉中实现了来源于米曲霉 RIB40 的谷氨酰胺酶 gahB 的重组分泌表达，为此后对米曲霉谷氨酰胺酶的研究提供了基础。