【摘 要】
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为获得具备良好抗原性和生物活性的J亚群禽白血病病毒(AL V-J)env基因主要功能区的表达产物,采用特异性引物分别从保存的pMD 18T-envHB2010质粒、PIRES2-EGFP中扩增ALV-J env
【机 构】
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长江大学动物科学学院,湖北荆州,434025
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为获得具备良好抗原性和生物活性的J亚群禽白血病病毒(AL V-J)env基因主要功能区的表达产物,采用特异性引物分别从保存的pMD 18T-envHB2010质粒、PIRES2-EGFP中扩增ALV-J env基因主要功能区和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,酶切、连接后插入pFastBac Daul载体,构建杆状病毒转移载体pFastBac Daul-env-EGFP,将其转化DH 10Bac感受态细胞制备重组杆粒Bacmid-env-EGFP,转染Sf9细胞进行真核表达.结果显示,转染了重组杆粒的Sf9细胞在倒置荧光显微镜下呈现亮绿荧光;以ALV-J单克隆抗体JE9进行Western blot检测,转染重组杆粒的Sf9细胞检测出约85 ku的条带.结果表明,目的基因在Sf9细胞中得到了良好的表达,为进一步研究ALV-J提供基础试验材料.
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