【摘 要】
：
目的 制备可溶性重组日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3( rSj14-3-3),并研究其免疫学特性.方法 采用反转录聚合酶链反应方法从日本血吸虫成虫mRNA中制备Sj14-3-3基因cDNA片段,将
【基金项目】
：
江苏省卫生厅项目;江苏省自然科学基金;江苏省医学重点人才项目;江苏省科技厅公益专项基金;国家重大科技专项项目;国家自然科学基金
论文部分内容阅读
目的 制备可溶性重组日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3( rSj14-3-3),并研究其免疫学特性.方法 采用反转录聚合酶链反应方法从日本血吸虫成虫mRNA中制备Sj14-3-3基因cDNA片段,将此cDNA片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-3的谷胱甘肽还原酶的基因下游,构建重组表达质粒Sj14-3-3/pGEX-4T-3.重组质粒转化大肠埃希菌BL21,转化子细菌采用异丙基-3-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导,表达产物经SDS-PAGE以观察重组GST-Sj14-3-3表达情况.GST-rSj14-3-3经凝血酶消化后,经过Glutathione Sepharose-4B胶亲和层析制备纯化的rSj14-3-3.rSj14-3-3免疫家兔制备免疫兔血清,经免疫印迹试验分析rSj14-3-3免疫原性和反应性.结果 日本血吸虫江苏株Sj14-3-3蛋白基因编码序列被成功克隆,开放阅读框的DNA序列与基因库中的登录序列同源性为99.08％.构建的含Sj 14-3-3蛋白基因的重组表达质粒经IPTG诱导能表达分子量约为55 kDa的融合蛋白,融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析获得纯化的rSj14-3-3.rSj14-3-3能诱导家兔产生高效价的特异性抗体,该抗体可识别重组和天然的14-3-3蛋白.结论 本研究成功制备了可溶性rSj14-3-3,其具有良好的免疫原性与反应性.
其他文献
使用不同夹带剂,用超临界CO_2流体萃取丹参中3种丹参酮,研究不同夹带剂的萃取效果。在优化操作条件下萃取丹参中3种丹参酮,HPLC测定萃取物中3种丹参酮的质量分数。3种夹带剂
针对某污水处理厂二级生化出水,开展了曝气生物滤池中试实验研究.分别开展了下向流和上向流滤池形式的实验研究,通过对比实验,最终确定适宜的滤池形式和滤料；并对气水体积比、
采用灰化法处理样品,火焰原子吸收光谱法测定了辣椒中Fe、Zn、Cu、Mn、Mg、Ca、Na元素的含量。结果显示辣椒中这几种元素的含量分别是176.0、26.8、47.2、36.1、1646.7、163.
间充质干细胞(MSCs)是一类存在于许多成熟骨组织中的原始细胞群,具有自我更新和增殖能力,在适宜的微环境里具有多向分化潜能。鉴于MSCs具有易获得、易培养、低免疫原性、能在
目的 采用氨基酸置换对人乳头状瘤病毒16型E7抗原的人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞表位HPV-16E711-20进行修饰和鉴定.方法 运用量化模体方案对置换后的多肽与人白细
Based on the cylindrical cavity expansion theory,a plastic-damage-elastic model is proposed for the penetration problem of geo-material.In the model,the unified
花生品种远杂9102在多年的大田种植环境下,与其他花生品种相比,表现出优良的抗倒特性。从主茎高、茎秆抗倒伏指数、茎秆纤维素含量等3个指标入手,以期初步阐明与花生抗倒伏性
克隆了石斑鱼神经坏死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)的衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)基因序列并构建了绿色荧光蛋白(EGFP)基因与MCP基因的融合真核表达载体pEGFP-M
分析了国外科技期刊宏观运行环境中成熟的市场机制、完善的法律环境和政府的宏观调控三个最主要因素。认为成熟的市场机制是科技期刊生存与发展的"土壤";完善的法律环境是与
2000年以来。为配合国家“京津风沙源治理工程”。中国科学院在浑善达克沙地启动了“浑善达克和京北农牧交错区退化生态系统恢复试验示范研究”重大课题。连续开展了10年的生