【摘 要】
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目的 克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法 提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,首都医科大学同仁医院,第二军医大学长征医院
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目的 克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化。方法 提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆。将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利用GST纯化系统,对HuC重组蛋白进行纯化。结果 经过表达及纯化条件的摸索,最终获得重组HuC蛋白。结论 HuC蛋白是一种神经系统表达RNA结合蛋白,重组HuC蛋白的获得为HuC抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
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