【摘 要】
：
目的制备抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)单克隆抗体，并对单抗的活性与功能进行初步鉴定。方法利用免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合，获取杂交瘤细胞株，用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞克隆，单克隆化后制备小鼠腹水单抗，纯化获得抗H7N9亚型流感病毒NA的鼠源单克隆抗体，对抗体活性及功能进行鉴定。结果获得特异性抗H7N9亚型流感病毒
【机 构】
：
100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，中国国家流感中心,100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，中国国家流感中心,温州医科大学，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制
论文部分内容阅读
目的制备抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)单克隆抗体，并对单抗的活性与功能进行初步鉴定。
方法利用免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合，获取杂交瘤细胞株，用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞克隆，单克隆化后制备小鼠腹水单抗，纯化获得抗H7N9亚型流感病毒NA的鼠源单克隆抗体，对抗体活性及功能进行鉴定。
结果获得特异性抗H7N9亚型流感病毒N9鼠源单克隆抗体1G8、3C4和4E8，这三株抗体识别抗原表位不同，3C4和4E8能抑制神经氨酸酶活性，IC50分别为1.45 μg/ml和8.65 μg/ml。
结论3株单克隆抗体均特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白，有较好的N9结合活性或能抑制N9酶活性功能。本研究对新型H7N9禽流感病毒的诊断和防控提供了一个良好的思路。
其他文献
乙型肝炎病毒(HBV)感染的发病机制是宿主免疫系统和HBV之间复杂的相互作用，宿主免疫系统包括固有免疫和适应性免疫。现在认为，宿主对病毒及其蛋白的免疫反应是决定病毒清除、感染慢性化和肝细胞损伤的主要因素。固有免疫是宿主对抗病毒感染的第一道防线，但许多研究显示HBV可以逃避固有免疫识别、干扰固有免疫信号通路并介导免疫抑制。对固有免疫在HBV感染过程中的作用和状态研究有助于开发新的治疗方法，以达到根除
目的对四川省从蚊虫分离到的病毒SC1210进行鉴定并分析其基因组特征。方法利用披膜病毒科甲病毒属特异性引物进行RT-PCR鉴定，并采用二代测序平台Ion Torrent PGM进行基因组全序列测定，然后利用Mega Align软件对测定的核苷酸和推测的氨基酸序列进行比较分析，利用Mega 6软件绘制系统发生树。结果SC1210为盖塔病毒(Getah virus，GETV)，该株病毒基因组全长11
目的比较不同滴度轮状病毒(Rhesus rotavirus，RRV)对新生小鼠肝胆系统损伤的差异。方法新生小鼠出生24 h内，腹腔注射恒河猴轮状病毒(MMU18006病毒株)建立肝胆损伤动物模型；将80只BALB/c新生小鼠随机分成4组，每组20只，实验组分别注射不同滴度轮状病毒悬液，依次为高滴度(1×107 PFU/ml)、中滴度(1×106 PFU/ml)、低滴度实验组(2.5×105 PFU
目的分析CaM及其下游信号分子在羊瘙痒因子感染小鼠模型脑组织中的变化特点。方法利用Western blot及免疫组织化学方法检测羊瘙痒因子感染小鼠脑组织中CaM表达变化、分布特点及下游相关激酶及调控蛋白的表达变化。结果在羊瘙痒因子139A感染小鼠终末期脑组织中CaM的表达较正常对照小鼠明显上调且主要分布于139A感染小鼠的皮层、丘脑和小脑区域。在羊瘙痒因子139A感染小鼠终末期脑组织中下游激酶Ca
脑炎脑膜炎症候群是由细菌、病毒、寄生虫等多种病原体感染引起的中枢神经系统疾病。病毒性脑炎脑膜炎较为常见，主要病原体为虫媒病毒、肠道病毒、副粘病毒、疱疹病毒、弹状病毒和腺病毒等。本文概述了病毒性脑炎脑膜炎症候群病原学研究进展，并展望了病毒性脑炎脑膜炎症候群研究发展趋势。
目的比较HBV共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA, cccDNA) Real-time PCR检测方法。方法选择文献中常用的普通Taq-Man探针及Taq-Man MGB探针两种检测方法，合成引物及探针，制备质粒标准品，提取乙肝患者血清及肝组织标本HBV DNA，分别用质粒安全ATP依赖的DNA酶(Plasmid-safe ATP-dependent
目的分析诺如病毒急性胃肠炎疫情中患者的感染特点。方法收集2014年4月-2016年3月北京市诺如病毒急性胃肠炎疫情中的病例资料及标本，使用Real time RT-PCR检测患者标本中诺如病毒核酸及其分型，采用描述流行病学方法分析诺如病毒急性胃肠炎的感染特征。结果共收集1 743名诺如病毒急性胃肠炎临床诊断病例，其中12岁以下儿童占比77.68%(1 354/1 743)。688名病例中诺如病毒检
目的了解肛周尖锐湿疣人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及其型别分布，探讨HPV感染与年龄和性别的相关性，评价PCR-反向点杂交法检测HPV的方法学性能。方法对316例确诊或疑似肛周尖锐湿疣(CA)患者的石蜡标本进行HPV基因分型检测，其中58例进行HPV DNA测序。结果316例受检患者中HPV总感染率为81.6%，单一HPV型别感染排名前5位分别为HPV11、6、18、16和33；混合感染中型别以H
目的探讨伴合体滋养叶巨细胞的膀胱尿路上皮癌患者的临床病理特征、治疗方法、疗效评价及预后。方法回顾性分析我们收治的1例伴合体滋养叶巨细胞的膀胱高级别尿路上皮癌患者的临床病理资料，并复习相关文献。患者男，69岁。因全程、无痛性肉眼血尿就诊，CT检查提示膀胱前壁不规则结节灶，双肺多发结节影。膀胱镜检示膀胱壁一直径约1.5 cm的菜花样肿物。结果行经尿道膀胱肿瘤电切术，术后病理：膀胱肿物中可见部分肿瘤细胞