大鼠shRNA-Slfn5重组腺病毒载体的构建及其在EPCs中的转染效率

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ylmny

【摘要】

：

目的构建大鼠shRNA-Slfn5重组腺病毒载体并观察在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法根据Rat Slfn5基因的mRNA序列设计合成siRNA片段5个,分别克隆到pDKD-CMV-U6-shRNA上转入

【作者】

：

李玉珠况春燕

【机构】

：

贵州大学医学院,贵州省人民医院心内科

【出处】

：

重庆医学

【发表日期】

：

2021年8期

【关键词】

：

Schlafen5 内皮祖细胞 shRNA

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(81560056),贵州省第十二批优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2019]5662),贵州省科技计划项目(黔科合基础[2018]1097),贵州省留学人员科技活动择优资助项目(黔人项目资助合同[2018]003号),贵州省科技平台及人才团队计划项目(黔科合平台人才2017-5405)。

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目的构建大鼠shRNA-Slfn5重组腺病毒载体并观察在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法根据Rat Slfn5基因的mRNA序列设计合成siRNA片段5个,分别克隆到pDKD-CMV-U6-shRNA上转入大肠杆菌感受态细胞,PCR筛选转化子,阳性克隆进行测序;利用Admax系统选取目的穿梭质粒shRNA-Slfn5(5)包装和扩增重组腺病毒shRNA-Slfn5及病毒滴度测定;利用Slfn5过表达腺病毒质粒中目的基因携带Flag标签,通过Western blot法检测Slfn5过表达腺病毒质粒与

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