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目的建立快速检测血液中常见致病菌包括大肠埃希菌(EC)、肺炎克雷伯菌(KP)、金黄色葡萄球菌(SA)及耐甲氧西林SA(MRSA)的多重聚合酶链反应(PCR)方法,有利于败血症的及时治疗。方法建立多重PCR方法对EC phoA基因、KP mdh基因、SA femA基因和MRSA mecA基因进行检测,并将16SrDNA作为致病菌感染对照。结果采用建立的多重PCR方法进行检测的特异性为100%,EC检测限为2.75×102CFU/mL,KP为2.43×103 CFU/mL,SA为3.13×102 CFU/mL,MRSA为3.03×102 CFU/mL;用多重PCR方法和传统血培养方法对300个血标本进行检测,传统血培养方法检测出187个血标本内阳性,多重PCR方法有4个血标本为假阴性,未能被检出。结论建立的多重PCR方法可简便、及时地检测血流感染中的EC、KP、SA和MRSA。