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目的:构建变形链球菌comE基因原核表达载体,诱导ComE融合蛋白高效表达,获取高质量的ComE融合蛋白。方法:提取变形链球菌基因组,PCR扩增得到变形链球菌comE基因片段,BamH Ⅰ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到pET28a(+)表达载体中,并转化入E.coli BL21(DE3)。IPTG诱导融合蛋白表达,Western blot鉴定表达产物。进行蛋白表达的可溶性鉴定,并优化诱导时菌液的A600值、IPTG浓度、诱导时间和温度4个表达条件。然后用优化的条件大量诱导表达ComE融合蛋白,采用镍柱和分子