【摘 要】
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目的 基于DNA条形码技术建立一种可以实现对大黄麈虫丸中水蛭成分真伪品鉴定的方法.方法 首先以CO Ⅰ通用引物对大黄座虫丸中成药DNA进行一轮聚合酶链式反应(PCR)扩增,随后采用自行设计和筛选出的水蛭通用引物对一轮PCR反应液进行二轮PCR扩增,联合Sanger测序技术,对二轮PCR扩增产物测序,最后对测序结果峰图采用seqman软件进行序列拼接,将拼接后的DNA序列在NCBI数据库中用BLAST在线比对软件进行比对判定,进而鉴定水蛭成分真伪.结果 本实验建立的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术通过
【机 构】
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苏州大学药学院分子诊断实验室,江苏苏州215000;苏州大学药学院分子诊断实验室,江苏苏州215000;苏州普瑞姆生物科技有限公司,江苏苏州215000
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目的 基于DNA条形码技术建立一种可以实现对大黄麈虫丸中水蛭成分真伪品鉴定的方法.方法 首先以CO Ⅰ通用引物对大黄座虫丸中成药DNA进行一轮聚合酶链式反应(PCR)扩增,随后采用自行设计和筛选出的水蛭通用引物对一轮PCR反应液进行二轮PCR扩增,联合Sanger测序技术,对二轮PCR扩增产物测序,最后对测序结果峰图采用seqman软件进行序列拼接,将拼接后的DNA序列在NCBI数据库中用BLAST在线比对软件进行比对判定,进而鉴定水蛭成分真伪.结果 本实验建立的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术通过了对9份经CO Ⅰ通用引物鉴定的水蛭干药材的验证,结果验证两方法鉴定结果一致.同时采用本研究建立的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术对收集的14批大黄座虫丸进行鉴定,共有5批鉴定出含有伪品水蛭成分.结论 本实验建立的的巢氏PCR方法联合Sanger测序技术能够实现对大黄?虫丸中水蛭成分真伪品的鉴定,对中成药的质量控制具有一定的意义.
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目的 建立吸附破伤风疫苗血清学效价检测方法并对其进行初步验证.方法 通过对采血时间、有效剂量范围的选择,建立附破伤风疫苗血清学效价检测方法,在3个实验室对10批破伤风疫苗用小鼠攻毒法和本研究方法进行19次效价检测,对2种方法的检测结果进行初步验证.结果 建立了吸附破伤风疫苗血清学效价检测方法.吸附破伤风疫苗小鼠攻毒法和本方法的重现性分别为16％和22％,破伤风三联疫苗两种方法的重现性分别为11％和5％,破伤风五联疫苗两种方法的重现性分别为48％和34％.配对t检验显示2种方法检测结果无统计学差异,Blan
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