【摘 要】
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目的探讨内皮细胞和血管组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的小泛素样修饰在糖尿病加速动脉粥样硬化中的作用。方法2014年9月至2017年1月选取14周龄雄性健康Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)32只,按随机数字表法分为对照假手术组、对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和泛素结合酶9(UBC9)转染组,每组8只。制备1型糖尿病大鼠模型,各组均有1只大鼠造模失败被排除。采用超声仪检测损伤侧颈总侧动脉和健侧颈总动脉收缩期和舒张期内径、动脉内膜厚度,计算标化颈总动脉舒张期直径(sCADD);采用
【机 构】
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首都医科大学宣武医院心脏内科,北京 100053航天中心医院心内科,北京 100049首都医科大学宣武医院心脏内科,北京 100053首都医科大学宣武医院心脏内科,北京 100053首都医科大学宣武医
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目的探讨内皮细胞和血管组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的小泛素样修饰在糖尿病加速动脉粥样硬化中的作用。
方法2014年9月至2017年1月选取14周龄雄性健康Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)32只,按随机数字表法分为对照假手术组、对照动脉损伤组、糖尿病动脉损伤组和泛素结合酶9(UBC9)转染组,每组8只。制备1型糖尿病大鼠模型,各组均有1只大鼠造模失败被排除。采用超声仪检测损伤侧颈总侧动脉和健侧颈总动脉收缩期和舒张期内径、动脉内膜厚度,计算标化颈总动脉舒张期直径(sCADD);采用HE染色和免疫组织化学染色检测内膜增殖情况,在中膜面积相当的情况下计算内膜面积与中膜面积比值。人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在高糖中培养24 h后采用实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测白细胞介素(IL)-8和IL-1β mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测动脉组织UBC9的表达水平,小泛素样修饰试剂盒检测PPARγ小泛素样修饰水平。体外培养HUVEC,检测在不同浓度和不同时间的高糖刺激下PPARγ小泛素样修饰水平。在体内和体外利用慢病毒过表达UBC9,再检测PPARγ小泛素样修饰水平。
结果对照假手术组、对照动脉损伤组和糖尿病动脉损伤组颈总动脉损伤8周后动脉内膜厚度、内膜增殖面积和内膜面积与中膜面积比值逐渐增加[(0.026 ± 0.018)、(0.084 ± 0.007)和(0.264 ± 0.022) mm,(0.18 ± 0.09) × 106、(0.32 ± 0.06) × 106和(1.64 ± 0.22) × 106 μm2,0.345 ± 0.073、0.570 ± 0.080和2.710 ± 0.220],sCADD逐渐降低(0.903 ± 0.084、0.800 ± 0.071和0.330 ± 0.036),差异有统计学意义(F =10.40、9.40、8.20和8.60,P
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