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探讨RNA干扰(RNAi)抑制多形性胶质母细胞瘤核因子-κB(NF-κB)的表达作用及其机制。
方法构建慢病毒p65特异性靶序列及其表达载体，并将其包装至293T细胞，之后转染A172细胞，小鼠随机分为空白组、模型组、低和高RNAi组及阴性对照组。在小鼠皮下造模14 d后低和高RNAi组小鼠经尾静脉分别注射RNAi慢病毒载体颗粒50、100 μl(1×105 TU/μl)、阴性对照组注射空白载体病毒颗粒100 μl(1×105 TU/μl)。
结果慢病毒转染A172细胞后可以显著抑制其增殖(P＝0.000)，与对照组比较，高剂量组存活率为60%。NF-κB p65特异性靶序列定向干扰A172细胞，3个RNAi组中p65蛋白的表达水平显著下降(P＝0.000)。动物实验结果显示，除空白组外，其余所有组小鼠体重自植瘤9 d后体重开始出现下降，高低剂量慢病毒干扰组小鼠体重在第18天体重出现回升，其中体重回升高剂量干扰效果略优于低剂量干扰组。模型组小鼠肿瘤体积显著高于两个RNAi组(P＝0.000)，阴性慢病毒对照组小鼠肿瘤体积无显著缩小。模型组和阴性对照组肿瘤组织中p65处于高表达水平，RNA高低剂量干扰组p65表达水平显著下降(P＝0.000)。炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在模型组中处于高表达水平，使用p65干扰RNA后能够有效抑制IL-1β和TNF-α的表达(P＝0.000)。
结论特异性干扰NF-κB p65蛋白表达后能够有效改善小鼠皮下种植胶质瘤A172带来的荷瘤压力和降低小鼠机体炎性反应。