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以毛梾叶片为试材,通过单因素2次循环试验对毛株IYxSR反应体系进行优化,建立了毛株ISSR-PCR的最佳反应体系和扩增程序。结果表明:PCR反应体系总体积为25uL,其中10XBuffer2.5弘L,模板DNA用量50ng,7aqDNA聚合酶用量1.5U,Ag浓度2.0mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,dNTPs浓度0.15mmol/L;扩增程序:94℃预变性5min;94℃变性50S,48.8~59.1℃退火60S,72℃延伸1.5min,38个循环;最后72℃延伸10min。在此基础上,从1