【摘 要】
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目的克隆肝型脂肪酸结合蛋白（LFABP）基因,构建其原核表达载体,并进行表达、纯化及鉴定。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法从cDNA中扩增出LFABP基因片段,通过酶切和连接,构建原核表
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30470877）, 河南省重点科技攻关资助项目（092102310006）
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目的克隆肝型脂肪酸结合蛋白（LFABP）基因,构建其原核表达载体,并进行表达、纯化及鉴定。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法从cDNA中扩增出LFABP基因片段,通过酶切和连接,构建原核表达载体pET-m-LFABP,转化入E.ColiBL21（DE3）,经IPTG诱导表达;应用亲和层析、凝胶过滤层析和Lipidex1000凝胶层析分级纯化目的蛋白。圆二色谱分析检测目的蛋白的二级结构和热稳定性。结果 SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量约为15×103,与理论值相一致;应用亲和层析、
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