【摘 要】
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随着蜂蜜消费的迅猛发展，蜂蜜的兽药残留问题日益成为食品安全领域的热点问题。为建立蜂蜜中氯霉素直接竞争 ELISA 检测方法，本文以抗氯霉素单克隆抗体为包被原，氯霉素-辣根过氧
【机 构】
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广东省食品质量与安全重点实验室畜禽产品精准加工与安全控制技术国家地方联合工程研究中心;
【基金项目】
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“十三五”国家重点研发计划重点专项(2017YFC1601700);广东省农业发展和农村工作专项(2017LM2152);广州市科技计划项目(2016201604030004)
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随着蜂蜜消费的迅猛发展，蜂蜜的兽药残留问题日益成为食品安全领域的热点问题。为建立蜂蜜中氯霉素直接竞争 ELISA 检测方法，本文以抗氯霉素单克隆抗体为包被原，氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物，TMB 作显色底物，对其主要影响因素，如标准品稀释液、包被温度、包被抗体稀释倍数等六个因素进行优化，同时还对该方法的准确性和稳定性进行了考察。结果表明：所建立的直接竞争 ELISA 标准曲线，曲线方程式为 y=-17.425x+97.509，相关系数为 R2=0.9913，IC50为 0.63 ng/m L，最低检测限和线性检测范围分别是：0.04±0.01 ng/m L 和 0.10~4.17 ng/m L；另外整个检测反应过程耗时约为 40 min。蜂蜜样品的检测限和定量限分别为 0.15 ng/g 和 0.33 ng/g，添加回收率在 97.58%~100.94%之间，批内变异系数和批间变异系数均小于 11%，表明该方法具有高精确度高稳定性。
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