【摘 要】
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目的 研究转化生长因子-β1/smad3信号通路对小鼠肺纤维化中细胞凋亡的调控作用及机制. 方法 54只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、肺纤维化模型组、肺纤维化+TGF-β1/smad3抑制剂干预组,每组18只.肺纤维化模型组、干预组经气管内注入博莱霉素3.5 mg/kg诱导肺纤维化模型,干预组于造模后的第3、4、5天经腹腔注射TGF-β1/smad3抑制剂SB431542(按4.2
【机 构】
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目的 研究转化生长因子-β1/smad3信号通路对小鼠肺纤维化中细胞凋亡的调控作用及机制. 方法 54只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、肺纤维化模型组、肺纤维化+TGF-β1/smad3抑制剂干预组,每组18只.肺纤维化模型组、干预组经气管内注入博莱霉素3.5 mg/kg诱导肺纤维化模型,干预组于造模后的第3、4、5天经腹腔注射TGF-β1/smad3抑制剂SB431542(按4.2 mg/kg,用10％乙醇溶解),正常对照组给予等剂量生理盐水.造模后第7、14、28天各组随机处死6只小鼠,留取右肺上叶组织石蜡包埋切片行苏木素-伊红(HE)染色和马松三色(Masson)染色;右肺中下叶组织碱水解法测羟脯氨酸(HYP)含量;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡情况;左肺组织经蛋白印记法(Western blot)测定肺组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase3)和磷酸化smad3 (p-smad3)的表达. 结果 正常对照组肺泡结构正常,而肺纤维化模型组第7天时肺泡呈炎性改变,第28天时发展为明显肺纤维化;随时间推移肺纤维化模型组羟脯氨酸含量、细胞凋亡指数呈上升趋势,各时间点的变化均明显高于正常对照组(P＜0.05);肺纤维化模型组caspase3、p-smad3的含量较正常对照组各时间点均增加(均P＜0.05);干预组肺泡炎、肺纤维化程度、羟脯氨酸含量、细胞凋亡指数及caspase3、p-smad3的表达较肺纤维化模型组相对应的时间点均减轻(均P＜0.05). 结论 细胞通过TGF-β1/Smad3信号通路使细胞凋亡上调而促进了肺纤维化的发生,SB431542可以通过抑制该信号通路从而减轻肺纤维化。
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