长链非编码RNA RGD1566401在大鼠急性胰腺炎中对外分泌细胞凋亡的作用

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目的

观察长链非编码RNA(lncRNA)-RGD1566401(lncR-RGD1566401)在大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)中表达及对AR42J凋亡的影响。

方法

分别用携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒(Lenti-lncRNA)和特异性lncR-RGD1566401抑制剂(lncRNA Smart Silencer)转染AR42J细胞株24 h,转染空病毒(Lenti-NC)和特异性lncR-RGD1566401阴性抑制剂作为对照;以100 nmol/L雨蛙肽(Caerulin)体外诱导正常培养AR42J及转染后AR42J的凋亡,药物诱导24 h后运用流式细胞技术(FCM)检测各组AR42J细胞凋亡率,使用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测各组lncR-RGD1566401的表达,采用Western blot检测各组凋亡蛋白活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和p53表达量变化。

结果

雨蛙肽体外诱导AR42J凋亡的凋亡率[(19.34±0.54)%]较对照组[(7.23±0.33)%]明显升高,lncR-RGD1566401表达量较对照组升高(5.43±0.31)倍,活性Caspase-3和p53表达量明显升高;转染携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒组lncR-RGD1566401表达量较空病毒组升高(8.24±0.22)倍,差异有统计学意义(P=0.006);AR42J凋亡率[(38.20±0.37)%]较空病毒组[(22.60±0.96)%]明显升高,差异有统计学意义(P=0.016);活性Caspase-3和p53表达量明显升高;应用特异性lncR-RGD1566401抑制剂组较阴性对照组lncR-RGD1566401表达量降低(0.54±0.14)倍,差异有统计学意义(P=0.003),AR42J凋亡率[(13.60±0.33)%]较阴性对照组[(19.60±0.46)%]明显降低,差异有统计学意义(P=0.012),活性Caspase-3和p53表达量明显降低。

结论

lncR-RGD1566401与大鼠AR42J细胞凋亡相关,上调lncR-RGD1566401的表达能够促进大鼠AR42J细胞凋亡。

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