【摘 要】
：
目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.
【机 构】
：
遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室,中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心
论文部分内容阅读
目的 探讨体外诱导人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化潜能.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离提取hAD-MSCs,流式细胞术分析和免疫细胞化学染色行表型鉴定.取第3代按2.5× 106个/ml或5×105个/ml细胞密度接种6孔培养板或预置盖玻片的24孔培养板,在含10mmol/L尼克酰胺和N2补充物的无血清HG-DMEM培养基培养,未诱导组为含10％胎牛血清的LG-DMEM基础培养基.分别于体外诱导第7、14、21天采用免疫细胞化学法检测胰岛素和β2微球蛋白的表达,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量,采用RT-PCR检测胰岛素mRNA和胰十二指肠同源异型盒因子1(PDX-1)mRNA的表达.结果 (1)hAD-MSCs高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44、CD73、CD166及波形蛋白；(2) hAD-MSCs诱导第7、14、21天胰岛素阳性细胞百分率分别为74.67％±1.53％、75.00％±1.00％、74.33％±1.53％,培养物上清液中胰岛素含量分别为(331.62±1.76)、(330.50±1.22)和(331.65±0.48) μIU/ml,各时点间比较无显著性差异(均P＞0.05),而未诱导组仍未见胰岛素阳性细胞；培养上清也未检测到胰岛素；(3) hAD-MSCs诱导前后均有PDX-1 mRNA和蛋白表达,胰岛素基因mRNA表达仅见于诱导组；(4) hAD-MSCs诱导组和未诱导组各时点均有β2微球蛋白表达,其阳性细胞百分率组间差异无显著性(均P＞0.05).结论 hAD-MSCs具有向胰岛素分泌细胞分化的能力,可能成为1型糖尿病细胞移植治疗的新的细胞供源.
其他文献
目的 确定第1类整合子中aadA2基因能否从上游无核糖体结合位点的密码子ATG起始翻译并合成有功能的蛋白.方法 定点突变含有不同翻译起始密码子的aadA2基因盒,并连同上游的可变
目的 探讨高压氧治疗对急性创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)大鼠神经行为学及细胞外信号调节激酶(extra- cellular signal regulated kinase 1/2,ERKl/2)表达的影
目的:观察胸腺肽、低分子肝素钙、血必净等中西药物联合治疗多脏器功能障碍综合征的临床疗效.方法:将符合病例入选标准的80例多脏器功能障碍综合征患者随机分为观察组、对照
介绍了英国国家卫生质量标准署(National Institute for Health and Clinical Excellence,NICE)制定临床诊疗规范的程序和组织机制,其中重点探讨了在英国卫生医疗体系内,NICE
目的 探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床特点、实验室检查、治疗措施以及肿瘤细胞来源与预后的关系.方法 对106例DLBCL患者进行国际标准化预后指数(IPI)评分、Ann Arbor
目的 探讨专职健康教育护士对溃疡性结肠炎患者实施健康教育的效果.方法 选择我科确诊为溃疡性结肠炎的患者80例,随机分为实验组和对照组各40例,实验组由专职健康教育护士进
数字化地籍是地籍测量的发展方向,数据质量是关系到地籍成果准确性和实效性的关键.本文主要时于外业数据质量检测方法进行研究,完成对地籍测量外业数据采集过程的数据质量检
公路与桥梁工程施工作为国家的基础设施建设，对于国家的发展和社会的进步有着重大的意义。正是由于其重要的地位，公路桥梁工程一旦出现塌方等问题，不仅需要重复建设，影响国民经济
汽水分离器的设计和风机的选型对于排气系统起决定性的作用,关系着整个系统的性能.通过改进蒸汽、空气混合气溢出量、通风机通风量、风机风压、局部阻力的计算,对涂装生产线
采用直接法和间接法测定了钯化法工艺条件下制备的125I种子源源芯的自屏蔽系数.结果表明,吸附基材表面积一定的情况下,吸附液初始活度的大小不影响基材的吸附率,125I种子源源