抗克百威单链抗体的可溶性表达载体的构建及鉴定

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为构建克百威(carbofuran,CBF)单链抗体(seFv)可溶性表达载体,实现其在大肠杆菌中的表达,以pCANTAB5E—scFv质粒为模板扩增CBF的重链(vH)及轻链(VL)片段,通过引物设计引入由15个氨基酸组成的连接肽(Gly4Ser)3,经重叠延伸拼接重链及轻链片段,并通过PCR扩增得到SCFv基因,再与载体pLIP6/GN连接,转化大肠杆菌BL21,阳性克隆质粒经PCR鉴定并测序。重组菌经0.6μmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)及低温诱导表达重组单链抗体,并通过SDS—PAGE和
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