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摘 要：对鸡传染性喉气管炎疫苗的选择进行免疫分析。将分别含有鸡传染性喉气管炎病毒基因的空载体制例和重组真核表达质粒分别肌注到雏鸡内，与攻毒后对免疫保护的效果进行观察。攻毒后，免疫应答被重组质粒所诱导，免疫保护率为1.25%，此基因疫苗可作为预防鸡传染性喉气管炎的一个方向。在鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫分析中，重组质粒在免疫效果上有着良好的作用，值得更加深入的分析和应用。
关键词：鸡传染性喉气管炎；疫苗；免疫分析
中图分类号：S858. 31 文獻标识码：A
鸡传染性喉气管炎作为一种传染性喉气管炎病毒，其不仅会造成鸡感染急性上呼吸道传染病，还会造成鸡产蛋量的下降和死亡，对养殖业的发展有着严重的不良影响。目前，在针对鸡传染性喉气管炎疫苗的研究中发现，鸡传染性喉气管炎预防感染的疫苗在毒力上比较强，并存在着宿主对载体本身免疫的限制。在这种情况下，DNA疫苗的发展有效地避免了以上疫苗的缺点，并取得了良好的效果，现总结如下。
1 材料与方法
1.1 材料
选择来自重庆兽医研究所监察室所提供的毒株和疫苗，1日龄免疫鸡80只，均由重庆兽医研究所实验动物部门提供，饲养在隔离器中。空载体制粒PCRTM3-Uni（简称为p）由兽医生物技术国家重点实验室保存，重庆兽医研究所执行构建含传染性喉气管炎病毒王岗株gB、gC、gD基因的重组真核表达质粒PgB、PgC、PgD。
1.2 方法
先对重组质粒PgB、PgC、PgD和空载体制粒P分别扩增，质粒按照碱裂解法进行处理，选取5mol/L的LiC1沉淀及RNaseA消化将RNA去除，浓度由紫外分光光度计测定，按照1μg/μl溶解于无菌生理盐水中[1]。然后，将80只1日龄鸡分成5组，每组16只，分别为：1——PgB，2——PgB、PgC、PgD混合，3——空载体制粒P，4——生理盐水，5——减毒疫苗。接着进行免疫，其中，质粒组1、2、3在3周龄时初免，每只计量为100μg，5周龄进行二次免疫，剂量不变，4点小腿肌肉注射，第2组中的PgB、PgC、PgD计量均为每只100μg。生理盐水组免疫周龄和质粒组相同，减毒疫苗组在5周龄时滴眼接种减毒活疫苗[2]。在第10周，所有组别中的鸡群按照致死剂量的病毒进行注射。免疫后，每周从鸡翅初静脉采血一次，一直到攻毒后的2周停止，攻毒后对每组鸡的死亡和保护率进行统计分析。
2 结果
从表1中可以看出，攻毒后，5组鸡的死亡率和保护率分别为PgB组：死亡率18.75%，保护率81.25%；PgB、PgC、PgD组：死亡率18.75%，保护率81.25%；空载体制粒P组：死亡率75.00%，保护率25.00%；生理盐水组：死亡率75.00%，保护率25.00%；减毒疫苗组：死亡率0.00%，保护率100%，重组质粒诱导了免疫应答，这一基因可作为预防鸡传染性喉气管炎疫苗的一个补充。
3 讨论
鸡传染性喉气管炎是由疱疹病毒所引起的一种急性呼吸道传染病，鸡在感染这一病毒后，主要的症状表现为呼吸困难、咳嗽、咳血等，剖检时，喉部有出血和糜烂的情况[3]。就鸡传染性喉气管炎来讲，其具有传播快、死亡率高的特征，严重的影响着养鸡业的发展。
目前，针对鸡传染性喉气管炎的治疗尚无有效治疗的药物。在病症的预防上主要是通过疫苗防疫来进行的。在本次的疫苗免疫分析研究中，主要探讨的方向是鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫应答和免疫保护效果，经抗体检测结果发现，免疫2周后，空载体制粒P组16只鸡的死亡数量和其他4组相比较非常低，经免疫结果分析，2个重组质粒组鸡群在发病率和死亡率上均低于生理盐水组和空载体质粒P组，高于减毒疫苗组；在保护率上高于生理盐水组和空载体制粒P组，低于减毒疫苗组，免疫应答被重组质粒所诱导，因此，这一基因疫苗可作为预防鸡传染性喉气管炎的一个补充。
综上，在鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫分析中，采用DNA疫苗能有效的避免采用减毒活苗所带来的鸡群潜伏感染情况，在开拓鸡传染性喉气管炎疫苗上有着重要的开拓价值。
参考文献
[1] 辜新贵，赖柏松，吴小春等.五种鸡传染性喉气管炎疫苗免副反应的综合评估[J].中国家禽，2012，34（10）：48-50.
[2] 邵攀峰，陈红英，崔保安等.鸡传染性喉气管炎病毒PCR快速检测方法的建立[J].安徽农业大学学报，2010，37（01）：58-62.
[3] 朱旭东，杨增歧，梁金平等.鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗免疫效果试验[J].动物医学进展，2012，26（06）：112-114.
关键词：鸡传染性喉气管炎；疫苗；免疫分析
中图分类号：S858. 31 文獻标识码：A
鸡传染性喉气管炎作为一种传染性喉气管炎病毒，其不仅会造成鸡感染急性上呼吸道传染病，还会造成鸡产蛋量的下降和死亡，对养殖业的发展有着严重的不良影响。目前，在针对鸡传染性喉气管炎疫苗的研究中发现，鸡传染性喉气管炎预防感染的疫苗在毒力上比较强，并存在着宿主对载体本身免疫的限制。在这种情况下，DNA疫苗的发展有效地避免了以上疫苗的缺点，并取得了良好的效果，现总结如下。
1 材料与方法
1.1 材料
选择来自重庆兽医研究所监察室所提供的毒株和疫苗，1日龄免疫鸡80只，均由重庆兽医研究所实验动物部门提供，饲养在隔离器中。空载体制粒PCRTM3-Uni（简称为p）由兽医生物技术国家重点实验室保存，重庆兽医研究所执行构建含传染性喉气管炎病毒王岗株gB、gC、gD基因的重组真核表达质粒PgB、PgC、PgD。
1.2 方法
先对重组质粒PgB、PgC、PgD和空载体制粒P分别扩增，质粒按照碱裂解法进行处理，选取5mol/L的LiC1沉淀及RNaseA消化将RNA去除，浓度由紫外分光光度计测定，按照1μg/μl溶解于无菌生理盐水中[1]。然后，将80只1日龄鸡分成5组，每组16只，分别为：1——PgB，2——PgB、PgC、PgD混合，3——空载体制粒P，4——生理盐水，5——减毒疫苗。接着进行免疫，其中，质粒组1、2、3在3周龄时初免，每只计量为100μg，5周龄进行二次免疫，剂量不变，4点小腿肌肉注射，第2组中的PgB、PgC、PgD计量均为每只100μg。生理盐水组免疫周龄和质粒组相同，减毒疫苗组在5周龄时滴眼接种减毒活疫苗[2]。在第10周，所有组别中的鸡群按照致死剂量的病毒进行注射。免疫后，每周从鸡翅初静脉采血一次，一直到攻毒后的2周停止，攻毒后对每组鸡的死亡和保护率进行统计分析。
2 结果
从表1中可以看出，攻毒后，5组鸡的死亡率和保护率分别为PgB组：死亡率18.75%，保护率81.25%；PgB、PgC、PgD组：死亡率18.75%，保护率81.25%；空载体制粒P组：死亡率75.00%，保护率25.00%；生理盐水组：死亡率75.00%，保护率25.00%；减毒疫苗组：死亡率0.00%，保护率100%，重组质粒诱导了免疫应答，这一基因可作为预防鸡传染性喉气管炎疫苗的一个补充。
3 讨论
鸡传染性喉气管炎是由疱疹病毒所引起的一种急性呼吸道传染病，鸡在感染这一病毒后，主要的症状表现为呼吸困难、咳嗽、咳血等，剖检时，喉部有出血和糜烂的情况[3]。就鸡传染性喉气管炎来讲，其具有传播快、死亡率高的特征，严重的影响着养鸡业的发展。
目前，针对鸡传染性喉气管炎的治疗尚无有效治疗的药物。在病症的预防上主要是通过疫苗防疫来进行的。在本次的疫苗免疫分析研究中，主要探讨的方向是鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫应答和免疫保护效果，经抗体检测结果发现，免疫2周后，空载体制粒P组16只鸡的死亡数量和其他4组相比较非常低，经免疫结果分析，2个重组质粒组鸡群在发病率和死亡率上均低于生理盐水组和空载体质粒P组，高于减毒疫苗组；在保护率上高于生理盐水组和空载体制粒P组，低于减毒疫苗组，免疫应答被重组质粒所诱导，因此，这一基因疫苗可作为预防鸡传染性喉气管炎的一个补充。
综上，在鸡传染性喉气管炎疫苗的免疫分析中，采用DNA疫苗能有效的避免采用减毒活苗所带来的鸡群潜伏感染情况，在开拓鸡传染性喉气管炎疫苗上有着重要的开拓价值。
参考文献
[1] 辜新贵，赖柏松，吴小春等.五种鸡传染性喉气管炎疫苗免副反应的综合评估[J].中国家禽，2012，34（10）：48-50.
[2] 邵攀峰，陈红英，崔保安等.鸡传染性喉气管炎病毒PCR快速检测方法的建立[J].安徽农业大学学报，2010，37（01）：58-62.
[3] 朱旭东，杨增歧，梁金平等.鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗免疫效果试验[J].动物医学进展，2012，26（06）：112-114.