小反刍兽疫病毒N基因的原核表达

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Haroldzhang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性.根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成.设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达栽体pET-28a-N.阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度.通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性.扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达栽体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应.
其他文献
microRNAs(miRNAs)是近年来发现的普遍存在于动植物体内的一类非编码RNA,传统观点认为,它们通过其种子序列定位于靶mRNA的3′非编码区,并发挥抑制靶mRNA翻译的作用.最新的研
嘌呤能P2受体家族分为离子通道P2X受体和G蛋白偶联的促代谢型P2Y受体。P2Y受体包括P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11、P2Y12、P2Y13及P2Y14,其在神经系统广泛分布,在神经元存活
目的用ELISA检测试剂盒,探索一种恒河猴血清抵抗素(Resistin)定量的快速检测方法,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。方法选择用于人抵抗素检测的ELISA定量检测
孔子十分注重获取情报,在搜集情报的方法上,提出"以德感化"法,即以施恩德来感化人,让人家主动送情报上门的方式来得到情报;"观行观色"法,即充分发挥视觉捕捉情报的作用;"观过
为克隆、表达绵羊细粒棘球蚴Eg Ag B基因,并纯化重组蛋白,采用PCR方法从绵羊肝脏包囊病料中扩增Ag B基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析.将Ag B基因亚克隆入原核表
研究了4种溶氧变动模式条件下,鱼夋鱼幼鱼肝脏和肌肉氧化应激指标的变化。试验结果表明,在“近饱和稳定”模式下,鱼体肝脏中氧化应激指标含量的变动比较一致,具有一定的变动节律,
首先研究了制造执行系统在流程企业外部供应链和内部系统结构的重要联系作用,继而以钢铁企业为例提出制造执行系统的集成模型,对企业运作系统进行了功能模块划分,并对制造执
对18个芳樟[Cinnamomum camphora (L.) Presl]无性系叶片光合色素含量和叶绿素荧光参数进行了测定,并对各参数的相关性进行了分析;基于上述测定结果对供试的18个芳樟无性系进
本研究旨在通过慢病毒介导的基因转移方法,使NB4细胞稳定过表达hβc基因,观察过表达hβc基因的NB4细胞在IL-3或GM-CSF作用下分化行为的改变,探讨hβc基因与NB4细胞分化之间的
酵母被广泛用于分子生物学中基因功能的检测.为扩大酵母株系UCC419在抑制基因活性检测方面的应用,本研究通过向UCC419株系中导入用特殊引物扩增出的包含标记基因TRP1的PCR片