【摘 要】
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目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对马兜铃酸(AA)所刺激的肾小管上皮细胞结构损伤的影响.方法:以不同浓度AA(10、20、40μg/ml)刺激LLC-PK1细胞株,同时培养体系中加入不同浓度的
【机 构】
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南京军区南京总医院博士后科研工作站,解放军第四五五医院南京军区肾脏病专科中心
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目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对马兜铃酸(AA)所刺激的肾小管上皮细胞结构损伤的影响.方法:以不同浓度AA(10、20、40μg/ml)刺激LLC-PK1细胞株,同时培养体系中加入不同浓度的EPO(5、10、20U/ml),另设对照组.各组细胞培养24h后,透射电镜观察细胞的超微结构,TUNEL法原位检测细胞凋亡情况,流式细胞仪检测凋亡细胞的比例.结果:电镜显示:与AA 10 μg/ml组相比,AA 10 μg/ml+EPO 20 U/ml组有少数细胞线粒体肿胀或呈早期凋亡改变(异染色质),大部分细胞结构基本正常;AA 10μg/ml+EPO 10 U/ml组与前者相似,有少数细胞出现凋亡.AA 20μg/ml和AA 40μg/ml刺激的细胞经不同浓度EPO干预后,细胞的损伤无明显变化.TUNEL结果:经AA 10 μg/ml、20 μg/ml刺激后,核染色阳性的细胞百分比与对照组比较明显增加(P＜0.05).与AA 10μg/ml组比较,EPO 10 U/ml和EPO 20 U/ml可明显降低阳性细胞的百分比(P＜0.05).流式细胞仪显示:经AA 10 μg/ml、20 μg/ml刺激24h后,细胞凋亡的比例明显增加(P＜0.05),AA 20 μg/ml组凋亡和坏死的细胞比例高于AA 10 μg/ml组.与AA 10 μg/ml组比较,EPO 10 U/ml和EPO 20 U/ml干预后细胞凋亡比例有所下降,以EPO 20 U/ml作用显著(P＜0.05).AA 20 μg/ml组细胞凋亡的比例与EPO干预后的各组比较无显著差异.结论:EPO通过抑制细胞的凋亡从而对AA所刺激的肾小管上皮细胞结构的损伤产生保护作用,但对细胞的坏死改变无明显影响.
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