背景 脉络膜新生血管(CNV)是引起视力障碍的重要原因之一,发生机制复杂.黏着斑激酶(FAK)在调控细胞增生、存活、移行和分化等细胞进程中发挥重要作用,参与新生血管的应答.然而,FAK在CNV发生中的作用尚未见相关报道.目的 观察氧化衰老、细胞外基质(ECM)成分和吞噬光感受器外节膜盘(POS)等CNV生成相关因素作用下人视网膜色素上皮(RPE)细胞中FAK的表达及磷酸化变化,探讨FAK在CNV发生中的作用.方法 体外原代培养来自于供体眼的人RPE细胞,并分别暴露于H2O2氧化衰老、吞噬POS和ECM成分等刺激因素.用10、20、50、100μmol/L 4种浓度的H2O2处理培养的RPE细胞20d,诱导RPE细胞氧化衰老;用含终密度1×106/ml POS的培养液培养RPE细胞20d,设置正常细胞对照组、单纯POS处理组、200μmol/L CoCl2缺氧组及POS+缺氧组;将RPE细胞接种于涂布100mg/L的纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和Ⅰ型胶原酶的培养皿中,分别继续培养30min和1h.在不同时间点收集细胞提取总蛋白,Western blot法观察不同时间点RPE细胞中FAK的表达及磷酸化FAK(pFAK)变化.结果 20μmol/L及50μmol/L H2O2处理组FAK蛋白在RPE细胞的表达量明显高于对照组,而pFAK在各H2O2处理组均较对照组明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01).长期吞噬POS后,RPE细胞内出现消化不完全的溶酶体颗粒;单纯POS处理组与对照组间RPE细胞中FAK和pFAK的表达量差异无统计学意义(P>0.05),但单纯缺氧组FAK和pFAK的表达量较对照组均升高,POS+缺氧组pFAK的表达较单纯缺氧组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01).与对照组比较,在FN、LN和Ⅰ型胶原刺激后1h,RPE细胞中pFAK表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 在衰老、吞噬POS和ECM成分等因素作用下,RPE细胞中出现FAK的表达及磷酸化,提示FAK在CNV发生过程中发挥调控作用。