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选用两种可相互配对的抗人胰岛素(hIns)单克隆抗体,其中一种包被塑料孔条作固相抗体,另一种经生物素化后作液相抗体,再以辣根过氧化物酶标记的亲和素放大检测信号,建立了高度特异和灵敏的人血清真胰岛素酶联免疫分析法。其灵敏度为0.8mU/L,工作范围为1.5~160.0mU/L,与高剂量的人胰岛素原和C肽等无交叉反应,平均回收率达101.7%,批内和批间变异系数分别为4.1%和7.0%。用本法和放射免疫测定同时测定正常人和2型糖尿病患者血清胰岛素的含量,其结果的相关系数分别为0.914(15例)和0.964(10例)。提示本方法测定hIns较常规RIA有更多优点。