【摘 要】
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目的 研究微小RNA(miR)-137通过靶向无翅和整合位点生长因子5a(Wnt5a)抑制宫颈癌细胞生长及其作用机制.方法 采用qPCR检测宫颈癌细胞HeLa、C33A、Caski中miR-137和Wnt5a mRNA的表达水平.Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-137靶向调控Wnt5a基因.常规培养宫颈癌细胞HeLa,分为NC组、miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组,采用脂质体2000进行各组细胞的转染.采用CCK-8实验、平板
【机 构】
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内蒙古科技大学包头医学院第二附属医院妇产科,内蒙古 包头 014030
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目的 研究微小RNA(miR)-137通过靶向无翅和整合位点生长因子5a(Wnt5a)抑制宫颈癌细胞生长及其作用机制.方法 采用qPCR检测宫颈癌细胞HeLa、C33A、Caski中miR-137和Wnt5a mRNA的表达水平.Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-137靶向调控Wnt5a基因.常规培养宫颈癌细胞HeLa,分为NC组、miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组,采用脂质体2000进行各组细胞的转染.采用CCK-8实验、平板克隆和EdU实验检测各组细胞的增殖活性.Western印迹检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路的表达.结果 与Wnt5a-wt+NC共转染组相比,Wnt5a-wt+miR-137共转染组的荧光素酶活性显著降低(P<0.05).与NC组Wnt5a mRNA表达相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组均显著降低,且miR-137 mimic组显著低于miR-137 mimic+oe-Wnt5a组(均P<0.05).与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞增殖活性显著降低(P<0.05).而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞增殖活性显著增加(P<0.05).与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞平板克隆形成能力显著降低(P<0.05).而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞平板克隆形成显著增加(P<0.05).与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞Edu阳性细胞率显著降低(P<0.05).而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞Edu阳性细胞率显著增加(P<0.05).与NC组相比,miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞中Wnt5a和 β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05),而与miR-137 mimic组相比,miR-137 mimic+oe-Wnt5a组细胞中Wnt5a和β-catenin蛋白表达显著增加(P<0.05).结论 miR-137靶向调控Wnt5a表达抑制宫颈癌细胞生长.
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