【摘 要】
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为了构建肿瘤靶向性的人突变型IL-18新基因并进行真核表达,以重组PCR技术构建EGF-IL-18融合基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统和Sf 9昆虫细胞株(来自秋天草地夜蛾)表达融
【机 构】
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温州医学院检验医学院细胞与分子医学研究所
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为了构建肿瘤靶向性的人突变型IL-18新基因并进行真核表达,以重组PCR技术构建EGF-IL-18融合基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统和Sf 9昆虫细胞株(来自秋天草地夜蛾)表达融合基因,纯化表达产物,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性.测序证明构建的融合基因为原设计EGF-IL18融合基因.SDS-PAGE和Western blot证明EGF-IL-18融合基因在昆虫细胞中获得表达,表达的融合蛋白的Mr约为20000,与理论值相符,纯化后融合蛋白具有特异
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