目的:构建藜草花粉变应原λ噬菌体cDNA表达文库,并进行初步鉴定。方法:用TRIzol试剂抽提藜草花粉总RNA并分离mRNA。以纯化的mRNA为模板,以含有XhoI内切酶位点和18 bp的Poly(dT)序列的引物,用ZAP Express cDNA合成试剂盒反转录合成cDNA。将cDNA修饰、分级纯化后,获得大于400 bp的cDNA片段。将带有黏性末端的双链ds cDNA与Uni-ZAP XR载体连接,采用ZAP Express cDNA文库合成试剂盒利用λ噬菌体构建藜草花粉λ噬菌体cDNA表达文库,用包装蛋白对合成的ds cDNA进行体外包装,以包装产物感染宿主菌XL1-Blue MRF即获得cDNA表达文库。用PCR方法检测cDNA表达文库的滴度和插入片段的大小。结果:构建的藜草花粉变应原λ噬菌体表达文库的滴度为9.7×108pfu/L,重组率为100%,库容量为4.85 pfu。插入片段的长度平均约为1.0 kb。结论:构建的cDNA表达文库的容量及插入片段的大小合适,适用于藜草花粉变应原cDNA克隆的筛选,为制备基因重组藜草花粉变应原疫苗奠定了基础。