氧化应激是视网膜损伤中重要的病理生理过程，探讨保护视网膜免受氧化应激损伤的方法具有重要的临床意义。研究证实银杏叶提取物具有抗氧化、抗凋亡、抗血栓、抗炎等多种功能，但其对人Müller细胞的抗氧化作用研究较少。

研究银杏叶提取物(EGb)对氧化剂三氧化二砷(As₂O₃)诱导的人Müller细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。

人Müller细胞株用含体积分数10%胎牛血清(FBS)、2 μmol/L谷氨酰胺和质量分数1%青链霉素双抗的DMEM/F12培养液进行培养和传代，取对数生长期的Müller细胞分为5个组，阴性对照组细胞采用常规培养法进行培养，在培养基中加入终质量浓度为5 mg/L的As₂O₃处理细胞24 h以建立细胞氧化损伤模型，然后将5、10和20 mg/L EGb分别加入模型细胞培养液中作用24 h，采用MTT法检测各组细胞的活力；采用CM-H2DCFDA荧光探针法测定各组细胞活性氧簇(ROS)含量；采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞中caspase-3 mRNA的相对表达量；采用Western blot法分别检测细胞质和细胞核中Nrf2蛋白的表达。

Müller细胞接种至培养瓶后24 h，倒置显微镜下可见接种细胞贴壁良好，培养6～7 d时Müller细胞的细胞体积较大，细胞质丰富，呈镶嵌样排列。As₂O₃处理组部分细胞凋亡，呈卵圆形悬浮在培养液中。MTT法测定结果表明，阴性对照组细胞活力(A值)最高，As₂O₃处理组细胞活力最低，而As₂O₃＋5 mg/L EGb组、As₂O₃＋10 mg/L EGb组和As₂O₃＋20 mg/L EGb组A值随着EGb质量浓度的增加而逐渐增加，各组间总体比较差异有统计学意义(F＝163. 57，P＝0. 00)。阴性对照组细胞中ROS荧光强度最弱，As₂O₃处理组最强，As₂O₃＋5 mg/L EGb组、As₂O₃＋10 mg/L EGb组和As₂O₃＋20 mg/L EGb组细胞中ROS荧光强度值随着EGb质量浓度的升高而逐渐减弱，各组间细胞中ROS荧光强度值的总体比较差异有统计学意义(F＝4 013. 61，P＝0. 00)。细胞内caspase-3 mRNA的相对表达量随EGb质量浓度的升高逐渐下降，各组间总体比较差异有统计学意义(F＝2 199. 72，P＝0. 00)。各组细胞质中Nrf2蛋白的表达比较，差异无统计学意义(F＝15. 42，P＝0. 40)；阴性对照组、As₂O₃处理组及As₂O₃＋5 mg/L EGb组、As₂O₃＋10 mg/L EGb组和As₂O₃＋20 mg/L EGb组细胞核Nrf2蛋白表达量(灰度值)分别为100. 01±0. 04、46. 59±0. 63、54. 51±0. 62、59. 93±0. 17和67. 60±0. 24，总体比较差异有统计学意义(F＝7 271. 72，P＝0. 00)，其中阴性对照组细胞核Nrf2蛋白表达量最低，而As₂O₃处理组最高，差异均有统计学意义(均P<0. 05)。

EGb以剂量依赖的方式减轻体外培养的人Müller细胞的氧化应激损伤，其机制与抗氧化和抗凋亡作用有关，其减轻Müller细胞氧化应激损伤的调控主要发生在细胞核。