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以产低温碱性脂肪酶约氏不动杆菌(Acinetobacterjohnsonii)LP28为出发菌株,采用EDTA和溶菌酶处理制备原生质体。确定其最佳处理条件为37℃的水浴下,以终浓度为0.15mg/mL的溶菌酶处理45min,最终可获得90%的原生质体形成率及0.9%左右的再生率。采用紫外诱变原生质体的方法,筛选得到脂肪酶高产菌株P169,酶活达5.16U/mL,比出发菌株提高2.19倍。