真核表达BMP4成熟肽及其对iPS细胞的分化抑制作用

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chengrui12345

【摘要】

：

目的研究BMP4因子在诱导型干细胞（iPS细胞）培养过程中的作用和起作用的相关通路。方法通过RT-PCR的方法从小鼠的胎盘组织中扩增BMP4成熟肽,并且在其N末端连接IgK分泌肽,此融合

【作者】

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丁道芳王臻徐浩徐乐勤梁倩倩赵永见施杞王拥军

【机构】

：

上海中医药大学龙华医院脊柱病研究所,复旦大学肿瘤医院中心实验室

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2012年10期

【关键词】

：

Igk-BMP4 免疫球蛋白κ链过表达诱导型干细胞细胞分化 bone morphogenetic protein 4 immunoglobulin kap

【基金项目】

：

Supported by National Basic Research Program of China（973Program,2010CB530400）, Key Project of National Natural Science Foundation of China（30930111）, Changjiang Scholar Chair Professor Project（[2009]

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目的研究BMP4因子在诱导型干细胞（iPS细胞）培养过程中的作用和起作用的相关通路。方法通过RT-PCR的方法从小鼠的胎盘组织中扩增BMP4成熟肽,并且在其N末端连接IgK分泌肽,此融合的片段克隆至pPYCAG载体上。重组质粒pPYCAG-IgK-BMP4转染至293T17细胞中并进行嘌呤霉素的筛选。通过细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定出表达BMP4的阳性克隆。为进一步检测上清中BMP4的生物活性,iPS细胞培养于含BMP4因子的细胞培养上清和LIF因子中,连续培养3代,并进一步观察细胞表型

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