【摘 要】
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目的:探讨RG108对人非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)A549和H1299细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养A549和H1299细胞,经不同浓度RG108处理
【机 构】
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南华大学附属第二医院心胸外科,湖南衡阳421001
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目的:探讨RG108对人非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)A549和H1299细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养A549和H1299细胞,经不同浓度RG108处理后,采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖率、细胞周期和凋亡水平;qPCR和Western blotting(WB)法检测细胞内TFPI-2 mRNA和蛋白的表达及TMPRSS4的表达量,以甲基化特异性PCR和比色法检测细胞中TFPI-2启动子区域甲基化的状态和程度;分别采用siRNA-TFPI-2和pcDNA3.0-TMPRSS4质粒敲减TFPI-2或过表达TMPRSS4,然后检测细胞增殖率及凋亡率的变化.结果:RG108处理后,A549和H1299细胞的增殖率显著降低(均P＜0.05)、细胞周期阻滞于G1/S期(均P＜0.05)而凋亡率显著增加(均P＜0.01),细胞中TFPI-2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01和P＜0.05),同时细胞中TFPI-2启动子区域甲基化程度显著降低(均P＜0.05)、TMPRSS4的表达也明显减少(P＜0.05).沉默TFPI-2表达后,A549和H1299细胞的增殖水平显著增加(均P＜0.05),而转染pcDNA3.0-TMPRSS4质粒则显著降低细胞的凋亡率(均P＜0.05).结论:RG108能够通过抑制TFPI-2甲基化负向调控TMPRSS4表达进而抑制A549和H1299细胞的增殖,并促进其凋亡.
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