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使用单因素和正交试验设计相结合的方法对培养基配方及培养条件进行优化提高嗜热链球菌AR333的胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)产量。获得最佳培养基配方为:脱脂乳粉15%(w/v)、半乳糖1%(w/v)、大豆蛋白胨0.5%(w/v)、磷酸氢二钾0.1%(w/v)。最佳培养条件为:接种量3%,40℃,初始p H 6.5,发酵时间16 h。优化后嗜热链球菌AR333的EPS产量可达256.97mg/L,比优化前的产量提高了3.6倍。