【摘 要】
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背景:研究表明,TACC3基因在多种肿瘤中均表达上调,因此体外特异性干预TACC3的表达,可能是治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的:探讨沉默TACC3基因表达对口腔鳞癌干细胞增殖和
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背景:研究表明,TACC3基因在多种肿瘤中均表达上调,因此体外特异性干预TACC3的表达,可能是治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的:探讨沉默TACC3基因表达对口腔鳞癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫磁珠分选技术从人口腔鳞癌细胞Cal-27中分选出CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞。shRNA转染组设计及合成TACC3 shRNA序列,利用LipofectamineTM2000将TACC3 shRNA序列转染至CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞,设置空载体转染阴性对照组和未转染组。转染48 h后,采用MTT、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验检测沉默TACC3基因对体外CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响;Western blot检测沉默TACC3基因对CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞Ki67、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果与结论:(1)细胞增殖:shR NA转染组细胞增殖速度、增殖相关蛋白Ki67表达水平明显低于阴性对照组和未转染组(P<0.05);(2)细胞克隆形成能力:shRNA转染组细胞克隆形成能力显著低于阴性对照组和未转染组(P<0.05);(3)细胞凋亡:shRNA转染组细胞凋亡高于阴性对照组和未转染组,促凋亡蛋白Bax水平高于未转染组、对照组,抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于阴性对照组和未转染组;(4)结果表明:干扰抑制TACC3基因表达,可抑制口腔鳞癌干细胞的增殖,促进其凋亡。
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