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目的探讨用细菌内同源重组法制备含TK自杀基因腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用。方法将TK基因自载体中切出，亚克隆至腺病毒穿梭质粒中，形成质粒pAdTrack-GFP-TK，将其PineⅠ酶切线性化后与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化BJ5183菌，抽提重组体腺病毒基因组质粒DNA，PacⅠ酶切后转染293细胞包装成腺病毒颗粒，观察其对肝癌细胞的感染效率和目的基因表达情况及肝癌细胞SMMC-7721感染含TK自杀基因腺病毒后加入丙氧鸟苷（GCV）的生存率和旁观者效应的体外观察。结果纯化所得腺病毒滴度约为2