研究2，3，7，8-四氯二苯二噁英(2，3，7，8- tetrachlrodibenzo-p-dioxin，TCDD)诱导的胎鼠腭发育过程中转化生长因子β3(transforming growth factor beta 3，TGF-β3)、DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases，Dnmts)基因启动子区CpG岛甲基化状态与TGF-β3、Dnmts表达量的相关性。
方法将18只C57BL/6J孕鼠完全随机分为TCDD组和对照组，每组各9只。TCDD组于妊娠第10.5天(gestation day，GD10.5)给予28 μg/kg的TCDD口服，对照组给予等体重体积的玉米油口服。分别于GD13.5、14.5、15.5处死孕鼠，收集2组胎鼠腭突组织。通过试剂盒进行基因组DNA提取、亚硫酸氢盐转化、甲基化特异性PCR，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，分析2组各时间点腭组织表达的TGF-β3、Dnmts启动子CpG岛甲基化状态。应用IBM SPSS 20.0软件进行统计分析，两样本间均数比较均采用独立样本t检验，所有结果作K-S检验均符合正态分布，方差不齐者采用校正t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
结果2组各时间点TGF-β3启动子区CpG岛均处于低甲基化水平， TCDD组和对照组GD13.5、GD14.5、GD15.5甲基化程度分别为(8.6±0.8)%和(8.7±0.8)%、(11.5±1.4)%和(11.7±1.0)%、(12.0±0.7)%和(12.1±0.5)%，相同时间点TCDD组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。Dnmt1启动子区CpG岛均处于高甲基化水平，TCDD组和对照组GD13.5、GD14.5、GD15.5甲基化程度分别为(73.9±1.1)%和(72.6±0.8)%、(70.8±1.7)%和(70.7±1.0)%、(69.4±2.2)%和(69.7±0.5)%，相同时间点TCDD组与对照组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。TCDD组Dnmt3a启动子区CpG岛1的甲基化水平在GD13.5和GD15.5高于对照组，分别为(21.9±1.1)%和(8.1±0.6)%(P<0.01)、(43.4±0.4)%和(32.9±0.7)%(P<0.01)，在GD14.5低于对照组，分别为(33.2±0.5)%和(42.9±0.3)%(P<0.01)。对照组Dnmt3a启动子区CpG岛2的甲基化水平在各时间点均高于TCDD组，GD13.5、GD14.5、GD15.5甲基化程度分别为(82.0±0.7)%和(32.3±0.6)%(P<0.01)、(62.7±1.0)%和(25.5±1.4)%(P<0.01)、(47.2±0.4)%和(30.3±1.4)%(P<0.01)。
结论TCDD诱导的胎鼠腭发育期间Dnmt3a启动子区接近第1外显子处CpG岛2的低甲基化水平，可能是Dnmt3a基因在GD13.5高表达的原因，并因此诱发胎鼠腭裂的基因组呈高甲基化状态。TGF-β3和Dnmt1启动子区CpG岛甲基化状态与TCDD作用无关。