【摘 要】
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目的 观察不同浓度姜黄素对子宫内膜癌孕激素耐药细胞的影响,探讨相关信号通路在影响子宫内膜癌孕激素耐药中的作用.方法 采用ETCM、GEPIA数据库分析姜黄素的靶点基因,进而筛
【机 构】
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山东大学齐鲁医院妇产科,山东 济南250012
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目的 观察不同浓度姜黄素对子宫内膜癌孕激素耐药细胞的影响,探讨相关信号通路在影响子宫内膜癌孕激素耐药中的作用.方法 采用ETCM、GEPIA数据库分析姜黄素的靶点基因,进而筛选出与子宫内膜癌及耐药相关的基因;测定已建立的子宫内膜癌Ishikawa细胞的孕激素耐药模型(IshikawaPR细胞系)的耐药性,将耐药细胞按不同浓度处理分为姜黄素组(给予0、5、10、20、40、60、80μmoL姜黄素)、孕激素组(给予0、5、10、20、40、60、90μmoL孕激素)和姜黄素+孕激素组(同时给予相同浓度的姜黄素和孕激素),采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)检测各组细胞的生长;采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)、小室穿透实验(Transwell)、线粒体膜电位检测分析姜黄素对子宫内膜癌耐药细胞的影响;数据库分析姜黄素靶向作用的蛋白,采用Western blotting检测不同浓度姜黄素刺激后耐药细胞内蛋白水平的变化,并结合数据库分析潜在的信号通路.结果 数据库分析结果显示,姜黄素靶点基因与PGR、ESR等肿瘤耐药基因密切相关;MTT结果显示,姜黄素能够抑制耐药细胞生长,导致细胞存活率下降(F=907.8,P<0.001),并且姜黄素和孕激素之间存在交互关系(F=51.34,P=0.004),当孕激素给药浓度分别为10μmoL(t=16.13,P=0.026)、20μmoL(t=33.23,P=0.006)、40μmoL(t=35.94,P=0.005)时,联合姜黄素可较孕激素单药处理使耐药细胞抑制效率更强.姜黄素(0、10、20μmoL)处理可抑制耐药细胞增殖(F=205.8,P<0.001)、侵袭(F=13.9,P=0.006),促进细胞凋亡(F=23.3,P=0.002);并且耐药细胞中CyclinD1、CASP3、MMP2、磷酸化的核内转录因子蛋白水平下降,孕激素受体表达升高.结论 姜黄素可抑制子宫内膜癌孕激素抵抗,可能是通过介导转录因子NF-κB失活实现.
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