RNA干扰致基因表达沉默细胞模型的建立

来源 :解剖学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gaogaozai11111

【摘要】

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目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用.方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体.以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将MDM2基

【作者】

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朱有凯林汉良马怡晖顾霞吴红阳廖冰

【机构】

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中山大学基础医学院病理学教研室

【出处】

：

解剖学研究

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

RNA干扰转染细胞模型基因表达 LIPOFECTAMINE 沉默 MDM2基因 shRNA siRNA 基因功能研究 RNA interference

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目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用.方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体.以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将MDM2基因的siRNA和shRAN表达载体导入细胞后,用多重RT-PCR和Western blot检测目标基因MDM2的表达水平.结果 K562细胞瞬时转染MDM2siRNA 48 h后,MDM2蛋白质表达下降超过60%;稳定转染shRNA表达载体后,MDM2基因在mRNA和蛋白质表达水平下降超过70%.实验结果

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